目的　构建快速高效克隆 PCR产物的克隆载体 (T载体 ) ,并对日本血吸虫肌动蛋白全长编码基因 PCR产物进行快速克隆。方法　日本血吸虫肌蛋白全长编码基因的扩增采用逆转录 -聚合酶链反应 (RT- PCR)方法。质粒 p GEM5 Zf (+)经限制性内切酶 Eco R V酶切 ,在仅含有脱氧胸苷三磷酸 (d TTP)的 PCR缓冲液中于 70℃作用 2 h,在每个片段的 3′端加上一个脱氧胸苷 (d T)碱基 ,构建成 T载体。根据 PCR扩增产物 3′端存在一个非模板依赖的脱氧腺苷 (d A)原理 ,将扩增产物直接克隆入 T载体并测序。结果　阳性克隆经琼脂糖凝胶电泳、限制性酶切分析、PCR及 DNA序列测定等均证实克隆获得成功 ,且效率很高。与曼氏血吸虫肌动蛋白比较 ,核苷酸和推断的氨基酸的同源性分别是 92 .5 %和 99.7%。结论　构建的 p GEM5 Zf- T载体对日本血吸虫肌动蛋白编码基因的PCR产物直接克隆既经济、简便 ,又快速、高效 ,所构建的 T载体由于在插入位点两侧具有 p UC/M13测序引物序列 ,可直接测定重组质粒中插入片段的核苷酸序列。所获得的日本血吸虫 (大陆株 )肌动蛋白编码基因与曼氏血吸虫有极高的同源性