【摘 要】
：
CRISPR/Cas系统（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/CRISPR-associated proteins）是原核生物中广泛存在的、用于抵御外源遗传物质入侵的获得性免疫防御系统。由II型CRISPR/Cas系统改造而来的CRISPR/Cas9技术，是继锌指核酸酶和转录激活样效应因子核酸酶后的第三代基因编辑技术。
【机 构】
：
云南师范大学生物能源持续开发利用教育部工程研究中心
【基金项目】
：
国家自然科学基金项目（31960023、32070106）； 云南省自然科学基金面上项目（202001AT070075）； 云南省中青年学术和技术带头人后备人才（2018HB05）； 云南省万人计划“青年拔尖人才”项目（YNWR-QNBJ-2019-01）；
论文部分内容阅读
CRISPR/Cas系统（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/CRISPR-associated proteins）是原核生物中广泛存在的、用于抵御外源遗传物质入侵的获得性免疫防御系统。由II型CRISPR/Cas系统改造而来的CRISPR/Cas9技术，是继锌指核酸酶和转录激活样效应因子核酸酶后的第三代基因编辑技术。基于近年文献综述CRISPR/Cas9系统的发现、免疫防御过程和作用机制，并总结其在微生物细胞中的应用研究进展。CRISPR/Cas9系统由tracrRNA、crRNA和Cas9蛋白组成的复合物识别PAM序列并行使切割功能，不同微生物来源的CRISPR/Cas9系统识别的PAM序列存在差异；CRISPR/Cas9技术对微生物尤其是传统遗传操作较难微生物的基因组编辑，例如碱基或大片段的插入、缺失或突变等更为简单、高效和易操作；CRISPR/Cas9以及CRISPRa和CRISPRi技术，在原核和真核微生物基因表达调控、代谢工程等领域具有巨大的应用潜力，如医药、食品以及工业等相关重要产品的获得。未来，结合微生物组学大数据等，继续挖掘不同微生物来源的CRISPR/Cas系统或其他新型基因编辑工具，并对已有CRISPR/Cas9系统继续优化升级，降低脱靶率、提高编辑效率并扩大CRISPR/Cas9的应用范围。
其他文献
为更好地研究靶向TrxR1的小分子化合物的细胞内靶点选择性，利用CRISPR/Cas9系统构建基因敲除TrxR1的HCT-116稳定细胞株。首先根据TrxR1基因序列和CRISPR/Cas9靶点设计原则，设计并选择合适的敲除位点，再根据敲除位点序列设计敲除TrxR1基因的sgRNA干扰序列，以pCasCMV-Puro-U6空质粒载体为骨架构建能表达该sgRNA干扰序列的重组质粒。质粒共转染至HCT
基因组编辑技术可对作物靶标基因进行定点删除、替换、插入等遗传操作,现已被广泛应用于作物基因功能解析和品种改良。简要介绍了基因编辑技术的发展历程,阐述了基因编辑技术CRISPR/Cas9系统的工作原理,以及基于CRISPR/Cas9的单碱基编辑、引导编辑器等一系列衍生编辑工具,同时总结介绍了近年来上述基因组技术在不同农作物性状改良中的应用实例。最后探讨了CRISPR/Cas9技术目前存在的一些局限性
CRISPR/dCas9是在CRISPR/Cas9基因编辑系统的基础上改造升级建立起的一种用于调控基因组转录与表观遗传修饰的系统,它不仅继承了CRISPR/Cas9系统的精准性,同时还展现出了良好的作用效果。在该系统中dCas9蛋白保留了Cas9蛋白结合DNA的能力而切割功能不复存在。将dCas9蛋白与不同的激活、抑制效应子域和表观遗传调控酶偶联,可以对基因表达与表观遗传修饰进行精确调控。组蛋白乙
英语与语文科目一样,是一门与生活联系较为紧密的语言学科,但部分教师在教学时,忽视了英语与学生生活之间的联系,教学方式和内容都过于生硬,对提升学生写作能力不利。要改变这一教学现象,教师应该注重在教学中融入陶行知先生的生活教育理念,加强教学与生活的联系,不断挖掘生活素材和教学素材,构建高效、优质的教学课堂。
本文首先阐述了成本数据库建立的市场背景及涵义,并提出施工企业建立成本数据库的必要性,然后分别从成本数据库的建立、维护和应用三方面进行了详细的分析,旨在提高施工企业的成本管理水平,增强企业的竞争力。
目的系统评价2型糖尿病患者并发轻度认知功能障碍的危险因素。方法检索CNKI、WanFang、VIP、CBM、Medline（PubMed）、EMbase、Web of Science和The Cochrane Library数据库从建库至2020年12月2日有关2型糖尿病患者并发轻度认知功能障碍危险因素的所有文献后进行Meta分析。结果共纳入文献18篇,研究对象3 083例。各危险因素的合并OR（
本文通过上浆辊与压浆辊的材料对上浆质量的影响情况,论述了先微孔后光辊配置橡胶压浆辊对提高浆纱质量作用明显。
隐喻不单单是修辞方法之一,也可作为重要的思维方式。在认知的过程之中,隐喻有着突出的作用,因而能够在小学英语课程教学之中加以运用,这样更利于提高小学生学习的能动性,让小学生对概念内容进行深层次的分析,开阔小学生的英语学习思路,达成"概念流利"的目标。
新时代背景下,学生的素质教育关系到社会主义建设的高效开展。因此,学校要秉持"立德树人"的原则,将高职英语教学与中国传统文化教育相结合,可以将中国传统文化中的茶文化全面渗透英语教学过程中,切实提升学生的综合素养,促进其个人和社会的更好发展。将技能教育与综合素养培育相结合,构建起全方位的育人体系,让茶文化中的淡泊、宁静、高远与新时代的英语教学相融合,实现英语教学的创新,带动新文化的发展。本文就茶文化在
背景确定LH-C的抗病毒活性及其对病毒感染的免疫调节作用。方法采用MTT法和空斑减少法测定LH-C的体外细胞毒性和抗病毒活性。用单周期病毒生长条件下的时程研究来确定病毒复制被阻断的阶段。用间接免疫荧光法检测LH-C对病毒核蛋白核输出的影响。用Western blotting和Real-time RT-PCR检测LH-C对不同信号转导事件和细胞因子/趋化因子表达的调节。病毒接种后,给BALB/c小鼠