白假丝酵母环核苷酸磷酸二酯酶2的异源表达、纯化与酶学特性分析

来源 :食品科学 | 被引量 : 0次 | 上传用户：my85643284

【摘要】

：

为获得白假丝酵母(Candida albicans)环核苷酸磷酸二酯酶2(phosphodiesterases 2,PDE2),以C.albicans基因组为模板,经聚合酶链式反应扩增获得目的基因,构建重组质粒pET28a-C.

【作者】

：

李赤霞陈滢张萌陈玉娟田元元王友升

【机构】

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北京食品营养与人类健康高精尖创新中心,山东凯普菲特生物科技有限公司,日照华伟大健康产业研究院

【出处】

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食品科学

【发表日期】

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2020年22期

【关键词】

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白假丝酵母环核苷酸磷酸二酯酶表达纯化高效液相色谱 Candida albicanscyclic nucleotide phosphodiesterasee

【基金项目】

：

国家自然科学基金面上项目(31972127),北京市教委科技计划重点项目(KZ201910011013)

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为获得白假丝酵母(Candida albicans)环核苷酸磷酸二酯酶2(phosphodiesterases 2,PDE2),以C.albicans基因组为模板,经聚合酶链式反应扩增获得目的基因,构建重组质粒pET28a-C.albicans pde2,转化至大肠杆菌BL21中,获得稳定表达的基因工程菌。所表达的蛋白通过亲和层析柱(Ni-NAT)、离子交换层析柱(Q-Sepharose)和分子筛层析柱(Sephacryl S200)逐步进行纯化。应用高效液相色谱方法测定纯化的PDE2蛋白(约62 kDa

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