HLA 分型技术在骨髓库上海分库高分辨检测工作中的初步应用

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HLA 分型技术在骨髓库上海分库高分辨检测工作中的初步应用.方法:使用ABI3730xlDNA 测序仪,采用SBT 单链直接测序法,对上海地区的960 份自愿加入中华骨髓库的志愿者血液标本进行DNA 测序,其中HLA-I 类基因对第2,3 和4 外显子单链单向测序,II 类基因对第2 外显子单链单向测序,以得HLA 高分辨分型结果;对部分呈现血清学表达不一致的模棱两可高分辨结果标本,通过S S O 技术确认;对部分呈现血清学表达一致的模棱两可高分辨结果标本,通过SSP 或对2,3,4 以外的外显子单链检测作进一步确认.结果:960 份中华骨髓库上海分库的样本进行HLA 的PCR-SBT 高分检测,用DNA 单链测序法一次性获得高分辨结果为720 例;对部分呈现血清学表达一致的模棱两可高分辨结果标本,通过S S P 技术或2,3,4 以外的外显子单链检测做进一步确认,共计标本211 例;对于部分呈现血清学表达不一致的21 例模棱两可高分辨结果标本我们采用S S O 技术最终确认了唯一的高分结果;此外,还检测到待确认新基因4 例.完成了本次实验标本100%高分结果入库要求.结论:SBT 单链测序技术为主,PCR-SSO,PCR-SSP 联合为辅,是骨髓库开展HLA 高分辨分型工作的有力工具.
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