【摘 要】
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低温驯化是生物适应寒冷环境的一个重要途径,了解低温驯化的机制对揭示生物如何在低温环境中存活并繁衍具有重要的意义.为了探究鱼类适应低温的机制,本研究建立了斑马鱼成纤
【机 构】
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上海海洋大学,水产种质资源发掘与利用教育部重点实验室,上海,201306;上海海洋大学,中国科学技术部,海洋生物科学国际联合研究中心,上海,201306;上海海洋大学,水产科学国家级实验教学示范中心,
【基金项目】
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国家自然科学基金面上项目(31572611)资助
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低温驯化是生物适应寒冷环境的一个重要途径,了解低温驯化的机制对揭示生物如何在低温环境中存活并繁衍具有重要的意义.为了探究鱼类适应低温的机制,本研究建立了斑马鱼成纤维ZF4细胞的单克隆细胞系,并在18℃长期培养适应16个月,成功获得了低温驯化细胞系.之后我们将18℃驯化组细胞和28℃未驯化组细胞放置13℃低温处理3d后,观察低温对驯化细胞和未驯化细胞的影响.我们发现18℃驯化细胞的形态与18℃～13℃3d处理组没有明显差别,并且细胞能正常生长,稳定传代,说明驯化后的细胞对低温已经产生了适应性.随后我们比较了18℃低温驯化组和28℃未驯化组的细胞形态发现,在13℃处理3d后,驯化组细胞连接较为紧密,整体状态未发生太大变化;而28℃未驯化组细胞聚集程度非常明显,细胞状态较差,死细胞数目增多.我们对细胞的存活率,活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量及细胞的凋亡程度进行检测发现,18℃驯化组细胞存活率高于28℃未驯化组(p＜0.05),ROS含量显著低于28℃未驯化组(p＜o.o1),凋亡程度显著低于未驯化组(p＜0.01),说明低温驯化能提高细胞的耐寒能力,在面临更低温度时,能减少ROS含量减轻细胞受损程度.总之,本研究成功建立了低温驯化细胞系,为今后抗寒机制的研究提供了实验材料,同时也为低温适应机制的进化历程追踪提供了研究基础.
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