DOP-PCR法检测单抗残余DNA的探讨

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目的:利用简并引物(Degenerate Oligonucleotide-Primed,DOP)PCR法,建立一种物种非特异性的宿主细胞残余DNA检测方法。方法:设计简并引物,优化实时定量PCR的条件,从而建立DOP--PCR法,检测5种重组单抗药物宿主细胞表达系统(CHO细胞、SP2/0细胞和NS0细胞)的残余DNA。结果:简并引物选择51Tag—N6-ATGTGG 3’,定量PCR条件优化为:低严谨性扩增的退火温度由;32℃以3%的斜率升至72℃,严谨性扩增后的荧光检测条件优化为77℃,30s。3个物
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