氨氮慢性胁迫对凡纳滨对虾肝胰腺氨代谢相关指标及细胞凋亡的影响

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【目的】探究在盐度3下氨氮慢性胁迫对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)氨代谢和细胞凋亡的影响,以期为凡纳滨对虾免疫机理研究和生产实践指导提供参考资料。【方法】将480尾初始体质量6.49±0.14 g的凡纳滨对虾分为4个组,6个平行,暴露于0(对照组)、0.9、5.2和12.0 mg/L的氨氮水体中,氨氮胁迫20 d和40 d后分别统计凡纳滨对虾体质量增长率和存活率,测定凡纳滨对虾血淋巴和肝胰腺中氨代谢相关物质和酶活性、抗氧化相关酶活性及细胞凋亡相关基因表达量,同时取肝胰腺制作石蜡切片进行Tunnel染色。【结果】随氨氮浓度增加,体质量增长率和存活率逐渐降低;血淋巴氨氮和尿素氮含量与上述呈相反趋势,20 d与40 d结果相近;肝胰腺谷氨酸脱氢酶(GDH)、谷氨酰胺合成酶(GS)和过氧化氢酶(CAT)活性在20 d升高,在40 d 5.2和12 mg/L组酶活性降低;氨氮胁迫20 d,肝胰腺总超氧化物歧化酶(T-SOD)活性12 mg/L组显著低于对照组(P<0.05);肝胰腺Cyt C和Caspase-3表达量各胁迫组显著高于对照组(P<0.05)。TUNEL检测结果显示,细胞凋亡数量随氨氮浓度增加而增加,且40 d较20 d更多。【结论】经过氨氮慢性胁迫后,环境氨氮扩散到血淋巴中,尿素氮含量随氨氮浓度增加而增加,而随时间变化不明显;当氨氮浓度高于5.2 mg/L时,肝胰腺谷氨酰胺合成途径在胁迫40d后受到抑制,氨代谢受到阻碍,应激产生的活性氧超出抗氧化系统调节范围,对肝胰腺造成损伤,诱导细胞凋亡发生,对凡纳滨对虾生长存活造成不利影响。
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