迟缓爱德华菌溶血活化蛋白EHA的原核表达及生物学活性

来源 :中国人兽共患病学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：zkc19890314

【摘要】

：

目的研究迟缓爱德华菌(Et)溶血活化基因(eha)原核表达蛋白EHA的生物学特性。方法构建重组载体pET28a+-eha,转入大肠埃希菌BL21,得到克隆子pEHA1。克隆子pEHA1超声破碎后离心,

【作者】

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成静高大庆许化溪

【机构】

：

江苏大学医学技术学院,东南大学基础医学院,江苏大学医学技术学院镇江

【出处】

：

中国人兽共患病学报

【发表日期】

：

2008年3期

【关键词】

：

迟缓爱德华菌溶血活化基因溶血素原核表达蛋白纯化 Edwardsiella tarda eha hemolysin prokaryotic expr

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目的研究迟缓爱德华菌(Et)溶血活化基因(eha)原核表达蛋白EHA的生物学特性。方法构建重组载体pET28a+-eha,转入大肠埃希菌BL21,得到克隆子pEHA1。克隆子pEHA1超声破碎后离心,上清用SDS-PAGE电泳分析。在不同条件下,IPTG诱导pEHA1菌表达EHA蛋白,该蛋白经Ni-NTA亲和层析柱纯化后,检测其溶血活性及Vero细胞毒性。结果测序结果表明,pET28a+-eha重组质粒的eha序列完全正确。SDS-PAGE电泳显示表达出一条17kDa左右的条带。在30℃,IPTG浓度为0

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