观察骨髓间充质细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)上清液对缺氧缺血性脑损伤(Hypoxic ischemic brain damage,HIBD)新生大鼠海马胶质纤维酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP)表达及学习记忆能力的影响,探讨BMSCs移植治疗HIBD大鼠的机制。
方法将7日龄新生SD大鼠随机分成假手术组、模型组、细胞组和上清液组,每组20只。采用结扎左侧颈总动脉、术后持续缺氧2 h建立HIBD模型。模型组大鼠于造模术后1周经左侧脑室注入0.01 mol/L的PBS溶液2 μl,细胞组和上清液组大鼠于术后1周分别以相同方法注入等量的BMSCs和BMSCs上清液;假手术组仅分离左颈总动脉,但不结扎,术后不进行缺氧干预,其余处理同模型组。术后8周Morris水迷宫试验检测大鼠的学习记忆功能,免疫组化检测大鼠海马齿状回GFAP的表达。
结果模型组探查训练时在目标象限的时间(T1)和对位探查训练时在目标象限的时间(T2)分别为(15.40±2.80)s、(16.45±1.16)s,均较假手术组缩短[T1(19.96±2.57) s、T2(25.32±2.54) s,P<0.05];细胞组[T1(17.54±1.80) s、T2(18.99±1.47) s]和上清液组[T1(17.40±2.37) s和T2(17.96±1.09) s]分别均较模型组延长(均P<0.05),但细胞组和上清液组T1和T2比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组海马齿状回GFAP阳性物质积分光密度(Integral optical density,IOD)值(15.26±1.49)较假手术组(12.82±2.56)增加(P<0.05),细胞组和上清液组IOD值分别为:(18.13±1.97)、(17.38±1.64),均较模型组增加(P<0.05),但细胞组和上清液组IOD值之间差异无统计学意义(P>0.05)。
结论BMSC上清液经侧脑室注入能够改善HIBD大鼠的学习记忆能力,主要机制可能为MSCs分泌的某些细胞因子促进了HIBD大鼠的神经修复。