探讨神经突触核蛋白-γ(SNCG)基因沉默对恶性胶质瘤细胞U87-MG增殖和凋亡的作用。
方法设计并合成5条特异针对SNCG基因的siRNA Oligo片段，将目的片段插入至慢病毒干扰载体系统中，经感受态细胞转化、PCR鉴定挑选阳性克隆测序后与慢病毒干扰载体共转染至293T细胞包装病毒。重组慢病毒载体感染U87-MG细胞后，采用实时定量RT-PCR法检测siRNA对SNCG基因表达的抑制作用，筛选出最优siRNA序列用于后续研究。分别采用克隆形成实验评价细胞生长能力，流式细胞术检测细胞周期、细胞增殖能力以及细胞凋亡水平的变化。
结果成功构建5种特异针对SNCG基因的慢病毒干扰载体(SNCG siRNA 1～5)，其中重组慢病毒株SNCG siRNA 3和siRNA 5沉默效率最为明显。与阴性对照组比较[(1.00±0.10)%]，SNCG siRNA 3和siRNA 5均能显著下调SNCG mRNA表达[mRNA相对表达量：siRNA 3(0.17±0.01)%、siRNA 5(0.13±0.01)%，P<0.05]；细胞克隆形成能力被明显抑制[细胞集落数量：siRNA 3(66±12)、siRNA 5(1±1)、阴性对照组(80±5)，P<0.05]；细胞增殖能力被明显抑制[S期细胞比例：(41.2±0.7)%、(39.9±0.5)%、阴性对照组(47.6±2.2)，P<0.05]；凋亡细胞明显增加[细胞凋亡率：siRNA 3(22.9±0.4)%、siRNA 5(28.6±0.9)%、阴性对照组(1.1±0.1)%，P<0.01]。
结论下调SNCG表达能够抑制胶质瘤U87-MG细胞的增殖能力，促进其凋亡；SNCG基因的靶向治疗可能成为一种非常有潜力的治疗手段，对胶质瘤的治疗具有重要意义。