【摘 要】
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为建立检测兔出血症病毒(RHDV)抗体的间接ELISA方法,应用杆状病毒表达系统表达的RHDV VP60包被酶标板,经间接ELISA的最佳反应条件优化试验确定:抗原的包被浓度为4.62μg/ml,标准
【机 构】
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江苏省农业科学院兽医研究所,南京出入境检验检疫局,江苏省动物疫病预防控制中心
【基金项目】
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农业部公益性行业科研专项(nyhyzx07-040), 现代农业产业技术体系建设专项资金资助项目(nycytx-44), 江苏省科技支撑计划——农业部分(BE2008372), 江苏省农业科技自主创新基金项目[CX(08)107]
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为建立检测兔出血症病毒(RHDV)抗体的间接ELISA方法,应用杆状病毒表达系统表达的RHDV VP60包被酶标板,经间接ELISA的最佳反应条件优化试验确定:抗原的包被浓度为4.62μg/ml,标准阴、阳性血清稀释度为1∶200,封闭液选用2%明胶;羊抗兔IgG最佳稀释度为1∶4 000。阻断试验、特异性试验、敏感性试验、重复性试验结果显示,该方法具有较高的特异性、敏感性和重复性。用建立的ELISA方法与血凝抑制试验对临床血清样品进行检测,结果显示,ELISA与HI检测兔血清的RHDV抗体阳性率分别为8
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