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米根霉（Rhizopus oryzae）脂肪酶在食品和油脂加工等方面具有广泛的应用前景。本研究通过PCR技术获得了米根霉脂肪酶前肽基因序列与成熟肽基因序列（ProROL），并将该基因克隆到表达载体pPICgK上。线性化表达质粒后电转化感受态毕赤酵母菌株（Pichia pastoris）GS115，通过筛选得到了阳性重组茵。摇瓶及7L罐发酵结果显示，以p-NPP为底物，上清胞外酶活分别为10．6U／mL和126．8U／mL。酶争性质研究发现，该酶的最适温度为40℃左右，在低于40qC条件下，保温30min后