【摘 要】
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目的:探究CXC趋化因子配体10（CXCL10）在癫痫大鼠和细胞炎症反应中的作用及机制。方法:构建大鼠癫痫模型，采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测对照组和模型组大鼠中CXCL10表达。无镁细胞液处理SH-SY5Y细胞建立癫痫细胞模型（SH-SY5Y组）,采用qRT-PCR检测空白组和SH-SY5Y组中CXCL10表达。用pcDNA3.1-CXCL10或si-CXCL10转染SH-SY5Y
【基金项目】
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陕西省自然科学基础研究计划项目（2022JM-590）；
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目的:探究CXC趋化因子配体10（CXCL10）在癫痫大鼠和细胞炎症反应中的作用及机制。方法:构建大鼠癫痫模型，采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测对照组和模型组大鼠中CXCL10表达。无镁细胞液处理SH-SY5Y细胞建立癫痫细胞模型（SH-SY5Y组）,采用qRT-PCR检测空白组和SH-SY5Y组中CXCL10表达。用pcDNA3.1-CXCL10或si-CXCL10转染SH-SY5Y细胞，采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测pcDNA3.1组、pcDNA3.1-CXCL10组、si-RNA组和si-CXCL10组中炎症细胞因子[肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）和IL-8]水平。SH-SY5Y细胞通过转染si-CXCL10或经Toll样受体4（TLR4）抑制剂（TAK-242）和激动剂脂多糖（LPS）处理，采用蛋白免疫印迹（Western blot）检测si-RNA组、si-CXCL10组、si-CXCL10+TAK-242组和si-CXCL10+LPS组中TLR4、NF-κB p-p65/p65蛋白表达水平。结果:模型组大鼠CXCL10 mRNA表达水平高于对照组（P＜0.05）。SH-5Y5Y组细胞CXCL10 mRNA水平高于空白组（P＜0.05）。过表达CXCL10升高SH-SY5Y细胞CXCL10 mRNA表达水平，而抑制CXCL10降低了SH-SY5Y细胞CXCL10 mRNA表达水平（均P＜0.05）。此外，过表达CXCL10使SH-SY5Y细胞培养液中TNF-α、IL-6和IL-8水平显著上升，si-CXCL10使SH-SY5Y细胞TNF-α、IL-6和IL-8水平显著下降（均P＜0.05）。过表达CXCL10促进了TLR4和NF-κB p-p65/p65蛋白表达，而敲低CXCL10可抑制TLR4和NF-κB p-p65/p65蛋白水平（均P＜0.05）。与si-CXCL10组比较，经LPS处理的癫痫模型细胞TNF-α、IL-6、IL-8水平上升，而经TAK-242处理的癫痫模型细胞TNF-α、IL-6、IL-8水平显著下降（均P＜0.05）。结论:CXCL10在癫痫大鼠和细胞中相对表达量均升高，沉默CXCL10可通过TLR4/NF-κB信号通路抑制炎性细胞因子表达，在癫痫炎症反应过程中发挥重要作用。
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