轮状病毒VP4基因和VP7基因原核表达载体的构建及表达

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经PCR从含有VP4基因、VP7基因片段的重组质粒pT-VP4和pT-VP7中扩增VP4、VP7基因,连接至pGEM-5zf(+).经筛选和鉴定正确后同时酶切目的基因和表达质粒pET-28a(+),连接、转化受体菌,经PCR、酶切和序列分析证明,连接向位和阅读框架是正确的,从而构建了轮状病毒保护性抗原VP4基因、VP7基因片段的原核表达载体pET28a-VP4、pET28a-VP7.重组质粒转化表达菌在IPTG诱导下,用SDS-PAGE、薄层凝胶扫描分析表达的蛋白.结果表明,表达的目的蛋白以包涵体的形式存
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