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从2～3日龄大鼠脑组织中抽提总RNA，应用RT—PCR技术扩增脑源性神经营养因子（BDNF）基因片段，将此片段克隆人T载体，酶切反应鉴定。然后双酶切BDNF-T载体和空质粒pEGFP（NI），将所获目的片段和线性空载体用T4DNA连接酶连接，构建真核表达载体pEGFP（N1）-BDNF，并进行酶切反应鉴定及DNA测序。序列测定的结果与GenBank比较，所克隆的BDNF基因从起始密码子ATG到终止密码子TAG全长共750bp序列完全相同。结果表明成功构建真核表达载体pEGFP（N1）-BDNF，为进一步研