背景 糖尿病是引发角膜神经病变的高危因素之一.沉默信号调控因子1(Sirt1)在糖代谢、脂代谢、胰岛素分泌调节中发挥着重要的作用,并与神经系统性疾病密切相关.目前,关于Sirt1与糖尿病性角膜神经病变的关系尚不完全清楚. 目的 探讨Sirt1在1型糖尿病C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠角膜及三叉神经节中的表达及其意义,探讨Sirt1与糖尿病性角膜神经病变的关系. 方法 取C57BL/6-Ins2Akita/J雄性小鼠与同窝出生的野生型C57BL/6小鼠各8只,分别作为1型糖尿病模型组和正常对照组.两组小鼠均在12月龄时过量麻醉处死,处死前检测空腹血糖、测体质量.取小鼠三叉神经节和角膜组织,采用苏木精-伊红染色法检测两组小鼠三叉神经节和角膜组织的组织病理学变化,用免疫组织化学法检测三叉神经节和角膜组织中Sirt1蛋白的表达和定位;用荧光定量PCR法检测Sirt1 mRNA在三叉神经节和角膜组织中的表达;采用Western blot检测两组小鼠三叉神经节和角膜组织中Sirt1蛋白的相对表达量,并进行比较.结果 C57BL/6-Ins2Akita/J 小鼠三叉神经节细胞大小不均,细胞排列较为疏松,神经纤维排列紊乱,角膜上皮细胞层数减少,角膜变薄;野生型C57BL/6小鼠神经节细胞排列紧密,细胞形态均一,神经纤维排列整齐.免疫组织化学法检测结果显示,C57 BL/6-Ins2Akita/J小鼠角膜中Sirt1蛋白的表达强度低于野生型C57BL/6小鼠.荧光定量PCR结果显示,Sirt1 mRNA在C57B L/ 6-Ins2Akita/J小鼠角膜表达的灰度值显著低于野生型C57BL/6小鼠(0.56±0.03 vs.0.98±0.13),差异有统计学意义(t=5.853,P=0.010);C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠三叉神经节中Sirt1 mRNA表达的灰度值为2.45±0.18,低于野生型C57 BL/6小鼠的2.51±0.22,但差异无统计学意义(t=0.587,P=0.599).Western blot检测结果显示,C57 BL/6-Ins2Akita/J小鼠角膜中Sirt1蛋白的表达显著低于野生型C57BL/6小鼠(0.780±0.017 vs.1.300±0.012),差异有统计学意义(t=33.140,P=0.001);两组小鼠间三叉神经节中Sirt1蛋白的表达差异无统计学意义(1.100±0.015 vs.1.110±0.017) (t=0.430,P=0.709).结论 12月龄C57B L/ 6-Ins2Akita/J小鼠角膜的神经和结构发育异常,Sirt1参与糖尿病角膜病变的发病,有可能是潜在的靶点分子。
沉默信号调控因子1在1型糖尿病模型小鼠角膜和三叉神经节中的表达及意义
【摘 要】
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背景 糖尿病是引发角膜神经病变的高危因素之一.沉默信号调控因子1(Sirt1)在糖代谢、脂代谢、胰岛素分泌调节中发挥着重要的作用,并与神经系统性疾病密切相关.目前,关于Sirt1与糖尿病性角膜神经病变的关系尚不完全清楚. 目的 探讨Sirt1在1型糖尿病C57BL/6-Ins2Akita/J小鼠角膜及三叉神经节中的表达及其意义,探讨Sirt1与糖尿病性角膜神经病变的关系. 方法 取C57BL/6-
【机 构】
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266071青岛,山东省医学科学院山东省眼科研究所山东省眼科学重点实验室——省部共建国家重点实验室培育基地,266071青岛,山东省医学科学院山东省眼科研究所山东省眼科学重点实验室——省部共建国家重点
【出 处】
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中华实验眼科杂志
【发表日期】
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2012年30期
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