【摘 要】
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目的:用色谱法纯化制备携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒。方法:采用5L生物反应器悬浮培养HEK-293N3S细胞进行病毒的扩增,冻融法裂解细胞,通过超滤、Source15Q离子交换层析和S
【机 构】
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军事医学科学院放射与辐射医学研究所,云南农业大学动物科学技术学院
【基金项目】
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国家高技术研究发展计划(2007AA021007)
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目的:用色谱法纯化制备携带绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒。方法:采用5L生物反应器悬浮培养HEK-293N3S细胞进行病毒的扩增,冻融法裂解细胞,通过超滤、Source15Q离子交换层析和Sepharose4Fast Flow凝胶过滤层析进行分离纯化,采用分光光度法和高效液相色谱法分析重组腺病毒产品的纯度,采用组织培养半数感染剂量方法测定病毒的感染滴度。结果:通过两步色谱层析得到产品,经分光光度法分析,其D260nm/D280nm比值为1.21,高效液相色谱法分析其纯度达96.5%,产品滴度为1.0
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