探讨丹酚酸A(salvianolic acid A, SAA)对缺血性脑损伤大鼠的保护作用及其可能机制。
方法54只成年雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组、脑缺血组和SAA组，每组18只。采用线栓法制作永久性大脑中动脉闭塞模型。SAA组在模型制作后0 h和6 h腹腔注射SAA(3 mg/kg)，其余各组注射等体积生理盐水。模型制作后24 h进行神经功能缺损评分，应用2，3，5-氯化二苯四氮唑染色检测脑梗死体积。采用TUNEL染色法检测细胞凋亡，免疫组化染色及蛋白质印迹法检测缺血皮质Wnt3a、β-连环蛋白和磷酸化糖原合酶激酶3β(phospho-glycogen synthase kinase 3β，p-GSK-3β)表达。
结果神经功能缺损评分显示，假手术组未见神经功能缺损(评分为0分)，SAA组神经功能缺损评分(中位数和四分位数间距)较脑缺血组显著降低[(3(2～3)分对4(3～5)分；Z＝－2.679，P＝0.007]。假手术组无梗死灶，SAA组梗死体积较脑缺血组显著缩小[(79.038±10.665)mm3对(212.702±8.029)mm3；t＝24.525，P<0.001]。假手术组仅见极少数阳性细胞，SAA组和脑缺血组TUNEL阳性细胞数量分别为(29.667±1.366)个/HP和(63.333±0.894)个/HP，前者显著少于后者(t＝14.115，P<0.001)。免疫组化染色显示，假手术组、脑缺血组和SAA组Wnt3a阳性细胞数量分别为(35.500±2.572)个/HP、(18.056±3.765)个/HP和(29.000±2.376)个/HP，3组间存在显著性差异(F＝115.972，P<0.001)，而且SAA组显著多于脑缺血组(P<0.01)；假手术组、脑缺血组和SAA组p-GSK-3β阳性细胞数量分别为(7.944±2.127)个/HP、(37.444±3.434)个/HP和(11.222±1.734)个/HP，3组间存在显著性差异(F＝730.580，P<0.001)，而且SAA组显著少于脑缺血组(P<0.01)；假手术组、脑缺血组和SAA组β-连环蛋白阳性细胞数量分别为(26.722±26.722)个/HP、(16.556±1.854)个/HP和(21.333±1.940)个/HP，3组间亦存在显著性差异(F＝33.385，P<0.01)，而且SAA组显著多于脑缺血组(P<0.01)。蛋白质印迹分析显示，假手术组、脑缺血组和SAA组Wnt3a表达水平分别为1.000±0.190、0.800±0.185和1.198±0.262，3组间存在显著性差异(F＝9.621，P<0.001)，而且SAA组显著高于脑缺血组(P<0.01)；假手术组、脑缺血组和SAA组p-GSK-3β表达水平分别为0.650±0.150、1.290±0.250和1.190±0.250，3组间亦存在显著性差异(F＝19.668，P<0.001)，而且SAA组显著高于脑缺血组(P<0.01)；假手术组、脑缺血组和SAA组β-连环蛋白表达水平分别为1.200±0.210、0.500±0.120和1.100±0.220，3组间存在显著性差异(F＝33.385，P<0.001)(P<0.01)，而且SAA组显著高于脑缺血组(P<0.01)。
结论SAA对缺血脑损伤大鼠具有一定的保护作用，其机制可能与上调Wnt3a和β-连环蛋白表达以及下调p-GSK-3β表达有关。