天花粉蛋白基因转烟草及其表达

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天花粉蛋白(Trichosanthin.以下简称TCS)具有广谱抗病毒作用。利用CaMV35S启动子,GUS报告基因,NPT(筛选标记基因构建了植物表达载体pBITG24。通过根癌农杆菌转化系统,将TCS基因-GUS融合基因导入烟草获得了转基因植株。采用X-Gluc染色检测到GUS基因在转基因烟草愈伤组织、植株的根、茎中都得到了表达。提取阳性烟草的总DNA作模板,进行PCR特异片段扩增,进一步证明TCS基因整合入烟草基因组。 Trichosanthin (hereinafter referred to as TCS) has a broad spectrum of antiviral effects. The plant expression vector pBITG24 was constructed by using CaMV35S promoter, GUS reporter gene and NPT (screening marker gene), and the TCS gene-GUS fusion gene was introduced into tobacco through Agrobacterium tumefaciens transformation system, and transgenic plants were obtained by X-Gluc staining GUS gene was expressed in the transgenic tobacco callus, plant roots and stems, and the total DNA of positive tobacco was extracted as a template for PCR specific fragment amplification, further demonstrating that the TCS gene is integrated into the tobacco genome.
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