【摘 要】
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四环素类抗生素是畜禽粪便中残留量最高的抗生素之一,黑水虻幼虫转化畜禽粪便有蓄积抗生素的风险,因此监测虫体抗生素的含量以明确其作为蛋白原料的饲用安全性十分必要.本研究建立了超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)快速检测黑水虻幼虫体内四环素(TC)和土霉素(OTC)残留的方法.采用乙腈-柠檬酸缓冲液与EDTA超声萃取,以PRiME HLB小柱固相萃取柱脱脂净化,以HSS T3柱分离后,采用电喷雾离子源正离子扫描(ESI+)、多反应监测模式(MRM),通过外标法定量分析.结果 表明:在0.1
【机 构】
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中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,海南海口571101;海南省热带生态循环农业重点实验室,海南海口571101;中国热带农业科学院环境与植物保护研究所,海南海口571101;海南省热带生态循环农
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四环素类抗生素是畜禽粪便中残留量最高的抗生素之一,黑水虻幼虫转化畜禽粪便有蓄积抗生素的风险,因此监测虫体抗生素的含量以明确其作为蛋白原料的饲用安全性十分必要.本研究建立了超高效液相色谱-串联三重四极杆质谱(UPLC-MS/MS)快速检测黑水虻幼虫体内四环素(TC)和土霉素(OTC)残留的方法.采用乙腈-柠檬酸缓冲液与EDTA超声萃取,以PRiME HLB小柱固相萃取柱脱脂净化,以HSS T3柱分离后,采用电喷雾离子源正离子扫描(ESI+)、多反应监测模式(MRM),通过外标法定量分析.结果 表明:在0.1～500 μg/L,OTC和TC的质量浓度与对应的色谱峰面积间呈良好的线性关系,R2分别为0.9999和0.9975.在50～250 μg/kg加标水平下,TC和OTC在黑水虻幼虫中的回收率为80.66％～ 101.16％,相对标准偏差3.36％～5.63％,OTC的LOD为0.07 μg/kg,LOQ为0.28 μg/kg;TC的LOD为0.23 μg/kg,而LOQ为0.76 μg/kg.运用该方法检测黑水虻幼虫中四环素含量,分别高达1000 μg/kg以上,残留率达15％以上,具有蓄积抗生素的风险.该方法可有效去除黑水虻幼虫基质中的高蛋白和高脂肪,具有分析时间短、准确度和灵敏度高等优点,可用于黑水虻幼虫四环素和土霉素残留的测定.
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本实验通过高效液相色谱法对饲料中6种游离氨基酸含量进行测定.采用0.1 mol/L盐酸溶液提取样品中的6种游离氨基酸,与1％2,4-二硝基氟苯(DNFB)溶液衍生后经高效液相色谱仪测定.结果 表明:饲料中6种游离氨基酸平均回收率为97.52％,检出限≥0.006％(信噪比S/N=3),定量限≥0.021％(信噪比S/N=10),重复性以变异系数计≥2.55％.综上,该方法适合饲料中6种游离氨基酸的测定.
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