汉滩病毒西安分离株84FLi M片段的克隆

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目的:克隆汉滩病毒84FLi株M片段的cDNA.方法:提取病毒总RNA,反转录为cDNA模板,用高保真的Taq酶扩增出G1和G2两个糖蛋白编码的基因片段:84M2.0(1~2058)和84M1.6(1964~3616).将这两个片段分别与T载体-pMD18-T连接,转化感受态大肠杆菌后获得两个分别为G1和G2编码的克隆pMD84M2.0和pMD84M1.6.再利用酶切连接的方法获得M片段全序列的cDNA克隆.结果:获得两个分别为G1和G2糖蛋白序列编码的克隆,进而酶切组装为含有M片段全序列的cDNA克隆.
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