为探究人粪污好氧堆肥最佳工艺参数，探究初始含水率对人粪污好氧堆肥腐熟及微生物群落结构变化的影响。以人粪污为原料，玉米秸秆为调理剂，设置初始含水率55%（MC55）、60%（MC60）和65%（MC65） 3个处理组，在60 L的密闭发酵罐中堆肥30 d。结果表明，在不同初始含水率条件下，堆肥产品均可达到腐熟标准，堆肥产物没有作物毒性（GI＞80%）。MC60和MC65处理堆肥产物均已达到无害化卫生标准，MC55处理堆肥产物未达到无害化卫生标准，其粪大肠菌群数依然高于10~2 MPN·g-1。3组处理中，细菌丰度均高于真菌，MC65有助于提高堆肥过程中细菌丰富度与多样性，但MC60可提高真菌多样性。3组处理间主要细菌门和真菌门组成一致，MC65处理增加了腐熟期拟杆菌门和担子菌门的相对丰度。升温期和高温期3个处理优势细菌属具有明显差异；腐熟期MC60和MC65处理细菌属组成具有相似性，MC55和MC65处理真菌属随时间的变化具有相似性。MC65处理增加了高温期Bacillus和Meyerozyma的相对丰度，增加了腐熟期uncultured＿bictureium和Coprinopsis的相对丰度。MC对真菌演替的影响大于细菌，随着堆肥的进行，MC对微生物群落结构的影响逐渐减小。MC65处理高温期持续时间最长，堆肥产物粪大肠菌群数最低，增加了腐熟期木质素降解菌的相对丰度，是人粪污好氧堆肥最佳初始含水率。本研究结果可为优化人粪污好氧堆肥工艺参数提供参考。