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目的克隆硒半胱氨酸插入序列(SECIS)结合蛋白(SBP)2基因,并构建其哺乳动物表达载体,导入293T细胞进行初步表达,分析其对硒蛋白P基因转录水平的影响。方法应用酶切的方法从保存的质粒p CMV-XL4-SBP2中将目的基因切割下来,并利用双酶切连接法将其连入哺乳动物表达载体pc DNA3.1(+)。采用脂质体转染法转染293T细胞后应用RT-PCR法检测SBP2基因的表达以及其超表达对硒蛋白P基因转录水平的影响。同时在转染细胞中添加无机硒后研究其对SBP2和硒蛋白P基因转录水平的调控。结果成功构建了