【摘 要】
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目的建立用于药物转运研究的角膜上皮细胞系培养模型并评价该细胞模型的致密性及细胞间紧密连接。方法采用人永生化角膜上皮细胞系进行培养,培养液为DMEM/F-12,培养板为孔径0
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目的建立用于药物转运研究的角膜上皮细胞系培养模型并评价该细胞模型的致密性及细胞间紧密连接。方法采用人永生化角膜上皮细胞系进行培养,培养液为DMEM/F-12,培养板为孔径0.4μm的Transwell-clear。隔日测定细胞的跨膜电阻值评价细胞的完整性。测定亲水性标记物6-羧基荧光素和亲脂性标记物罗丹明B的渗透性评价上皮细胞间的紧密连接和角膜上皮细胞的致密性。结果跨膜电阻值随培养时间的延长而增加,15d达到最大值,约为180Ω.cm2,此时角膜上皮细胞长成致密的复层结构。渗透性实验表明,亲水性6-羧基荧光素和亲脂性罗丹明B在人永生化角膜上皮细胞系培养模型的细胞渗透系数分别为(1.12±0.40)×10-6cm·s-1和(18.30±3.05)×10-6cm·s-1,渗透性比值为16;在离体兔角膜模型测得的表观渗透系数分别为(1.07±0.50)×10-6cm·s-1和(25.40±7.03)×10-6cm·s-1,渗透性比值为24。结论人永生化角膜上皮细胞系培养模型具备角膜细胞的完整性、致密性以及细胞间紧密连接。可用于药物角膜转运特性的评价。
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