观察皮肤软组织扩张器施加扩张应力条件下,皮肤组织表达色素上皮衍生因子(PEDF)的特征。
方法通过免疫荧光染色和Western blot检测大鼠扩张期皮肤样品中PEDF的表达、分布及PEDF蛋白表达水平;利用体外细胞牵拉装置和低氧培养箱分别对表皮细胞株HaCaT细胞进行处理,以模拟扩张皮肤中缺氧和机械应力微环境,探讨影响表皮细胞PEDF基因转录水平的主要组织微环境因素,此两组实验组分别为缺氧组和牵拉组,无任何干预组为对照组。
结果在缺氧处理后,取1、3、6、9 h的细胞,检测到细胞PEDF mRNA表达水平显著上调并维持在较高水平,1 h时缺氧组PEDF mRNA(2.271±0.781)高于对照组(0.392±0.174,P<0.05),3 h时缺氧组PEDF mRNA(3.419±0.774)高于对照组(0.385±0.207,P<0.05),6 h时缺氧组PEDF mRNA(2.886±0.019)高于对照组(0.491±0.134,P<0.05),9 h时缺氧组PEDF mRNA(2.673±0.219)高于对照组(0.122±0.040,P<0.05)。常氧条件下对HaCaT细胞施加牵拉应力培养相同时间后,检测到1 h细胞PEDF mRNA表达水平(1.535±0.199)高于对照组(0.392±0.174,P<0.05),3 h时牵拉组PEDF mRNA(1.078±0.167)与对照组(0.385±0.207)差异无统计学意义(P>0.05),6 h时牵拉组PEDF mRNA(1.295±0.012)与对照组(0.491±0.134)差异无统计学意义(P>0.05),9 h时牵拉组PEDF mRNA(1.500±0.104)与对照组(0.122±0.040)差异无统计学意义(P>0.05)。
结论采用皮肤软组织扩张器实施扩张时,组织微环境内缺氧及机械应力因素可分别显著上调皮肤表皮细胞PEDF的表达。