【摘 要】
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目的:建立ABCG2 34G>A和421C>A单核苷酸多态性位点的焦磷酸测序方法。方法:抽取志愿者静脉血入EDTA抗凝管,常规苯酚/氯仿法制备全血gDNA,生物素标记引物对扩增多态位点目的片
【机 构】
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中南大学临床药理研究所,皖南医学院弋矶山医院临床药学部,中南大学湘雅医院放射科
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目的:建立ABCG2 34G>A和421C>A单核苷酸多态性位点的焦磷酸测序方法。方法:抽取志愿者静脉血入EDTA抗凝管,常规苯酚/氯仿法制备全血gDNA,生物素标记引物对扩增多态位点目的片段,制备生物素标记单链模板,与测序引物退火结合后行焦磷酸测序。分析结果经毛细管电泳测序验证,并进行重复性检验。结果:本文建立了针对ABCG2 34G>A和421C>A多态性位点的焦磷酸测序方法,经毛细管电泳测序验证和重复性验证,结果准确可靠。ABCG2 34G和34A等位基因频率分别为79.5%和20.5%;421C和421A等位基因频率分别为72.7%和27.8%,均符合Hardy-Weinberg平衡。结论:本文建立的焦磷酸测序方法可准确、高通量、快速检测ABCG2 34G>A和421C>A单核苷酸多态性,并且特别适宜大样本量的临床及科研批量检测需要。
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