目的：研究乳杆菌发酵对坛紫菜发酵上清液营养成分及其抗氧化和抑制糖脂代谢关键酶活性的影响。方法：采用福林-酚法和亚硝酸钠-硝酸铝法分析乳杆菌发酵坛紫菜上清液中总酚和总黄酮含量；基于1H核磁共振代谢组学技术分析发酵上清液中的主要代谢产物；通过1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基、2,2’-联氮双（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）阳离子自由基、羟自由基清除能力实验和α-葡萄糖苷酶及胰脂肪酶活力分析实验，评价发酵清液的抗氧化活性和抑制α-葡萄糖苷酶及胰脂肪酶的活性。结果：乳杆菌发酵可有效提高坛紫菜发酵上清液中总酚和总黄酮的含量，促进乳酸、精氨酸、脯氨酸等代谢产物的释放。乳杆菌发酵增强坛紫菜上清液的抗氧化活性，其中乳杆菌发酵对羟自由基的清除效果最为显著，相当于700μg/mL VC对羟自由基的清除能力。此外，乳杆菌发酵坛紫菜上清液对α-葡萄糖苷酶的抑制活性较未发酵坛紫菜上清液提高了2.1～2.2倍，对胰脂肪酶的抑制活性最高可达（95.3±1.3）%，相比于未发酵坛紫菜上清液提高了95.7%；上清液中总酚和总黄酮的增加是其抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶及胰脂肪酶抑制活性增强的主要原因。结论：乳杆菌发酵可提高坛紫菜发酵上清液的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶及胰脂肪酶抑制活性，具有减缓和辅助治疗糖尿病、肥胖等慢性疾病的潜在功效。