【摘 要】
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【目的】为研究莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）泛素结合酶（Ubiquitin-conjugating enzymes，E2）CrUBC23在莱茵衣藻油脂代谢中的作用，为高产油微藻基因工程改良和揭示藻类油脂
【机 构】
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中国热带农业科学院热带生物技术研究所海南省海洋生物资源功能性成分研究与利用重点实验室; 海南医学院基础医学与生命科学学院;
【基金项目】
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海南省重点科技计划(ZDYF2018124);农业农村部财政专项(NFZX2018);国家自然科学基金(31870344);中国热带农业科学院基本科研业务费专项资金(19CXTD-32,1630052018001);中国热带农业科学院热带生物技术研究所基本科研业务费专项资金(1630052016009)
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【目的】为研究莱茵衣藻（Chlamydomonas reinhardtii）泛素结合酶（Ubiquitin-conjugating enzymes，E2）CrUBC23在莱茵衣藻油脂代谢中的作用，为高产油微藻基因工程改良和揭示藻类油脂合成及代谢调控机理奠定基础。【方法】qRT-PCR 分析莱茵衣藻在低氮、低磷胁迫下泛素结合酶 CrUBC23表达情况；克隆CrUBC23同源基因干涉片段和全长基因，构建RNAi干涉载体和过量表达载体，转化莱茵衣藻并检测生物量和油脂含量；构建CrUBC23-GFP 融合表达载体，用农杆菌浸染洋葱表皮细胞进行亚细胞定位。【结果】莱茵衣藻在低氮、低磷胁迫下CrUBC23 基因表达量显著增加，增加幅度分别为正常培养的4.98-5.80倍和1.85-5.20倍。RNAi干扰结果显示，转基因藻细胞中性脂含量降低5.5%，总脂含量降低3.16%-17.6%。过量表达结果显示，转基因藻细胞中性脂含量增加8.8%，总脂含量增加4.51%-14.03%。【结论】CrUBC23正向调控莱茵衣藻油脂代谢，该基因定位于细胞核。
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