【摘 要】
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[目的]利用同源重组技术构建TK基因缺陷的山羊痘病毒(GTPV)毒株,为研制出更安全、高效的GTPV弱毒疫苗和病毒载体提供备选毒株.[方法]采用PCR克隆GTPV AV41株TK基因(ORF56)及其侧
【机 构】
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广西动物疫病预防控制中心,钦州市动物疫病预防控制中心,隆安县动物疫病预防控制中心
【基金项目】
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广西青年科学基金项目(2013GXNSFBB053006,桂科青0991042)
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[目的]利用同源重组技术构建TK基因缺陷的山羊痘病毒(GTPV)毒株,为研制出更安全、高效的GTPV弱毒疫苗和病毒载体提供备选毒株.[方法]采用PCR克隆GTPV AV41株TK基因(ORF56)及其侧翼基因组片段,在TK基因内部插入报告基因EGFP抗性基因gpt达盒,构建GTPV重组转移载体pTK-Eg.将重组转移载体pTK-Eg与GTPV AV41株共转染Vero细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,鉴定其生长特性和遗传稳定性,并接种山羊评价其安全性和免疫原性.[结果]成功构建获得一株TK基因缺陷的重组
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