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卵巢癌死亡率在妇科肿瘤中居首位。尽管肿瘤减灭术及以铂类为基础的联合化疗在卵巢癌的治疗中起到了积极的作用,但因缺乏有效的早期诊断方法,70%的患者初诊时已为晚期患者。手术及化疗后复发率高、易出现耐药,因而患者的5年生存率长期停留在30%左右。PA家族在相当部分的卵巢癌中有过度表达,并与患者预后不良、复发、耐药相关。因此,本课题首先探讨uPA、PAI-1的表达与卵巢恶性肿瘤发生、发展、转移及其预后价值,构建了uPA、PAI-1真核表达载体并对其进行生物学行为研究。采用ELISA酶联免疫吸附法检测了49例卵巢恶性肿瘤、49例卵巢良性肿瘤及49例正常对照的血清中uPA、PAI-1的表达和22例卵巢恶性肿瘤患者术前、术后血清中uPA、PAI-1的表达。将结果与临床及病理资料进行统计学分析,并进行单因素生存分析及COX回归模型分析。结果显示:恶性卵巢肿瘤患者血中uPA、PAI-1的表达显著高于良性肿瘤及正常对照,相比较差异有显著性(p＜0.05);同一患者术前血中uPA、PAI-1的表达亦显著高于其术后(p＜0.05);在恶性卵巢肿瘤患者血清中,uPA、PAI-1的表达与肿瘤的临床分期、组织分化程度和有无淋巴结转移有关,与病理学类型无关;经COX模型多因素生存分析,对生存时间有影响的因素为有无大网膜转移。结果表明:uPA、PAI-1的表达与卵巢恶性肿瘤的发生,发展有关,并与恶性肿瘤的浸润转移有关。认为uPA、PAI-1有望在临床上成为判断侵袭、转移的指标之一。利用人卵巢癌组织进行RT-PCR扩增uPA、PAI-1基因cDNA,构建TA克隆,经酶切反应获取目的片段分别连接至pCMV-HA及pCDNA3.1(-)B,转化大肠杆菌,筛选阳性克隆并鉴定,并对克隆的全长片段进行DNA序列测序,构建了uPA及PAI-1的真核表达重组质粒。经Lipofectamine介导转染至无uPA及PAI-1表达的卵巢癌细胞株SKOV3,利用RT-PCR检测到转染后的SKOV3细胞mRNA uPA或PAI-1的表达,Wesern blot也检测出uPA或PAI-1蛋白的表达。研究结果提示:成功构建的uPA及PAI-1的真核表达质粒,为下一步研究uPA及PAI-1在卵巢癌侵袭转移中的作用打下基础。利用细胞生长曲线、细胞集落形成实验和流式细胞仪检测细胞生长增殖的变化;通过细胞侵袭、迁移和粘附能力检测,了解uPA、PAI-1基因的表达对卵巢癌上皮细胞SKOV3对侵袭粘附能力的影响。结果显示:表达uPA、PAI-1基因的卵巢癌SKOV3细胞株,其生长增殖能力增强,同时,细胞体外侵袭、迁移和粘附能力也得到增强。uPA、PAI-1基因的表达,促使卵巢癌上皮细胞SKOV3的增殖和转移等恶性表型进一步增强。因而认为uPA、PAI-1与卵巢癌的发展与侵袭转移有关,uPA、PAI-1有可能成为靶向阻断卵巢癌侵袭转移的分子靶点。