PHB(聚p-羟基丁酸)是通过微生物发酵而产生的一种胞内酯物,在营养不平衡的生长条件下可作为一种碳源贮存物质。其不仅具有与传统的化学合成塑料相近的物理特性,而且具有可以完全生物降解的特性,在未来的工业及生活中具有广阔的应用前景。在处理污水的产物剩余污泥中含有丰富的混合菌群,利用这些菌群,通过一定的驯化可以使其产生代替传统化学合成塑料的PHB。但是普通的驯化得到PHB的产量很低,所以本文主要探索合适的驯化条件使其高产PHB,并通过PCR-DGGE技术对其混合菌群多样性进行分析。(1)本研究通过调整活性污泥在驯化过程中碳、氮、磷比例以及供氧模式,来提高活性污泥积累PHB的能力。在驯化中以乙酸钠为碳源,采用自制的SBR,以A/O周期交替的循环驯化模式,逐级提高碳源浓度,限制氮源浓度,人为创造营养不均衡条件来逐步提高活性污泥积累PHB的能力。研究表明,当碳源浓度逐步提高,COD升高至1200mg/L, COD/N/P为1200/9.6/30时,活性污泥中PHB积累量达到最大,占细胞干重的64.2%。驯化过程中逐步提高COD负荷,并增加COD/N的值有利于PHB积累,利用苏丹黑和Albert法染色可以看出驯化的菌群内产PHB菌占有很大比例,通过透射电镜显示菌体胞内含有大量白色PHB颗粒。(2)应用PCR-DGGE技术及454高通量测序技术定期对驯化期间菌群多样性进行分析。结果显示,随着碳、氮、磷比例的改变,混合菌群中的菌群结构发生了显著变化,优势菌逐渐显现出来,随着高产PHB混合菌群的形成,菌群中的结构趋于稳定。经过DGGE菌群动态分析及对电泳条带进行回收和测序得出,混合菌群中不动杆菌属、芽孢杆菌属、拟杆菌属、金黄杆菌属及变形杆菌属为优势菌。