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本课题内容分为四部分:
1.真核表达载体plRES2-EGFPfrRAIL和plRES2-EGFP/CD的构建和鉴定;
2.FA-PEG-PEI和PEG-PEI的合成及其理化性质;
3.FA-PEG-PEI和PEG-PEI作为靶向质粒DNA传输载体的体外实验研究;
4.FA-PEG-PEI作为靶向质粒DNA传输载体的体内基因治疗实验研究。
第1章 真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD的构建和鉴定
目的:构建真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD,为研究其联合表达对恶性胶质瘤的联合治疗作用提供基础。
结论:
成功构建了构建真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD,为研究其联合表达对恶性胶质瘤的联合治疗作用奠定了基础。
第2章 聚乙二醇接枝支化聚乙烯亚胺(PEG-PEI)和叶酸(FA)-PEG-PEI的合成及其理化性质
目的:化学合成可降解性FA-PEG-PEI和PEG-PEI并研究其负载质粒DNA的能力,并检测得到的FA-PEG-PEI和PEG-PEI的理化特性。
结论:
合成的FA-PEG-PEI和PEG-PEI可以用于pDNA转染,为在体外检测其细胞毒性和转染效率、以便了解FA-PEG-PEI的基因转染效率及细胞毒性作用打下理论和实践基础。
第3章 FA-PEG-PEI作为靶向质粒传输载体的体外实验研究
目的:比较所形成纳米材料FA-PEG-PEI和PEG-PEI/DNA复合物在体外对细胞的毒性大小及其转染效率,为进一步体内基因治疗做准备。
结论:
明确了FA-PEG-PEI的基因转染效率及细胞毒性作用,证实FA-PEG-PEI可以作为C6和293T细胞基因靶向传输的载体。可进一步于动物体内进行联合基因治疗神经胶质瘤。
第4章 靶向FA-PEG-PEI作为传输载体的恶性胶质瘤体内基因治疗实验研究
目的:观察靶向纳米材料FA-PEG-PEI介导的联合基因plRES2-EGFP/TRAIL和plRES2-EGFP/CD在体外对C6胶质瘤细胞的杀伤作用以及在大鼠体内对C6胶质瘤基因治疗的疗效。
结论:
动物体内证实FA-PEG-PEI可以作为基因治疗神经胶质瘤体内基因靶向传输的载体,而且联合基因治疗效果较单基因治疗效果为佳,为寻找崭新的、行之有效的恶性胶质瘤基因治疗方法提供了基础。