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为了探讨猪全股骨胶原蛋白水解产物和股骨头胶原蛋白水解产物在自发性高血压大鼠(SHR)体内的降血压活性(以舒张压为指标),以及连续灌胃猪股骨头胶原蛋白水解产物对SHR血浆中的内皮舒张因子及相关酶和底物的影响,本研究以胰蛋白酶分别水解新鲜猪股骨头和全股骨胶原蛋白,将得到的水解产物进行超滤分级,取分子量<5ku的组分作为试验原料,先后进行了体外ACE抑制率检测试验、单次灌胃试验、连续灌胃试验和内皮舒张因子及相关酶和底物含量检测。(1)分别将猪全股骨和股骨头胶原蛋白水解产物配制成0.5、2.5、6、8、10、12、14mg/mL梯度浓度的溶液,采用紫外分光光度法分别测定各浓度水解液的体外ACE抑制率,根据SPSS概率分析结果计算出猪全股骨和股骨头胶原蛋白水解产物的IC50值分别为:3.55mg/mL和2.04mg/mL。表明猪股骨头和全股骨胶原蛋白水解产物均具有良好的体外ACE抑制效果,其中猪股骨头胶原蛋白水解产物的体外ACE抑制效果优于全股骨胶原蛋白水解产物。(2)单次灌胃猪全股骨和股骨头胶原蛋白水解产物后每2h采用尾动脉无创血压测量法测定SHR舒张压在灌胃后8h内的变化,与灌胃前比较。结果表明:单次灌胃全股骨胶原蛋白水解产物后,与灌胃前比较,30.0、50.0、70.0mg/kg.ig剂量组均没有显著的降压效果,而单次灌胃猪股骨头胶原蛋白水解产物后,三个剂量组舒张压显著下降,下降值分别为10.4、11.7、11.8mmHg,均能显著降低SHR舒张压。说明猪股骨头胶原蛋白水解产物体内降舒张压效果优于全股骨胶原蛋白水解产物。(3)单次灌胃不同剂量猪股骨头胶原蛋白水解产物后,每2h测量SHR舒张压与灌胃前比较,30mg/kg.ig剂量组的SHR舒张压在6h时极显著下降10.4mmHg;40mg/kg.ig剂量组的SHR舒张压未出现显著下降;50mg/kg.ig剂量组的SHR舒张压6h时极显著下降11.7mmHg;60mg/kg.ig剂量组的SHR舒张压8h显著下降7.2mmHg;70mg/kg.ig剂量组的SHR舒张压8h时极显著下降11.8mmHg。结果表明,30、50、70mg/kg. ig剂量组灌胃后,效果较优,选为连续灌胃的低、中、高剂量组。(4)连续灌胃SHR试验中,40d时,30mg/kg.ig剂量组SHR舒张压比阴性对照组低35.7mmHg;50mg/kg.ig剂量组比阴性对照组低28.5mmHg;70mg/kg.ig剂量组比阴性对照组低25.9mmHg,均能显著降低其舒张压(P<0.01),且不会影响SHR心率;对正常的SD大鼠的血压和心率无显著影响。猪股骨头胶原蛋白水解产物能够显著降低SHR舒张压,且对正常大鼠舒张压和心率无不良的副作用。(5)连续灌胃结束后,分别测定血浆中一氧化氮(NO)、一氧化氮合成酶(NOS)、L-精氨酸(L-Arg)、6-酮-前列腺素F1a(6-Keto-PGFla)、前列环素合成酶(PGIS)和前列腺素H2(PGH2)的含量。结果表明:低、中、高剂量组SHR血浆NO含量均极显著高于阴性对照组,其中低剂量组含量最高;低、中剂量组结构型一氧化氮合成酶(cNOS)的活性显著高于阴性对照组,高剂量组诱导性一氧化氮合成酶(iNOS)极显著高于其他各组;低剂量组SHR血浆L-Arg含量显著低于其他各组,其他各组间无显著差别;各组SHR血浆间6-Keto-PGFla无显著差异;中剂量组SHR血浆PGIS含量显著高于阴性对照组,低剂量组和高剂量组与阴性对照组无显著差异;中剂量组SHR血浆显著低于阴性对照组,低剂量组和高剂量组与阴性对照组无显著差异。可见,30、50mg/kg.ig剂量组猪股骨头胶原蛋白水解产物能够通过促进结构型一氧化氮合成酶(cNOS)的分泌从而促进NO的分泌降低舒张压,而70mg/kg.ig剂量组的猪股骨头胶原蛋白水解产物促进诱导性一氧化氮合成酶(iNOS)的分泌,从而促进NO的分泌降低舒张压;三个剂量组猪股骨头胶原蛋白水解产物对前列环素及其合成酶和底物的影响较小,说明猪股骨头胶原蛋白水解产物主要通过影响NO及其合成酶以降低血压。