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背景牙周病是口腔两大类主要疾病之一,在世界范围内均有较高的患病率,在我国患病率更居于龋病之上。随着我国进入老龄化社会,牙周病,尤其是牙周炎将成为突出的保健问题。关于牙周病的研究,目前已从研究疾病本身,发展到探讨其与全身疾病之间的关系。研究证实,牙周炎与糖尿病、心血管系统疾病、消化系统疾病等全身多个系统的疾病都有一定的关系。对于心血管系统疾病,尤其冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronary artery disease,CAD)简称冠心病(coronary heart disease,CHD),其与牙周炎之间的关系,逐渐引起了牙周和心内工作者的普遍关注。近年来,许多学者对牙周炎和冠心病做了一系列的研究,包括临床问卷调查、牙周检查、免疫学检查等,均发现二者之间存在显著的联系。然而,这些大多都是宏观研究。众所周知,牙周炎是一种以细菌为主的多因素疾病,而可能引起牙周炎的细菌也是非常复杂的。关于冠心病,随着研究的深入,有证据显示,CAD是一种炎症性疾病,某些细菌微生物可能会影响CAD动脉粥样硬化形成的过程。大量临床病理与流行病学研究提示近40%已发生心肌梗死和脑血管病的患者尚处在感染、炎症免疫和自身免疫状态。Cotrutz等指出,口腔卫生和牙周指数与心血管疾病密切相关,已被确认为心血管疾病独立的危险因素。基于牙周炎与CAD二者疾病的发生均与细菌感染有关,而且临床调查显示,二者之间存在一定的联系,所以如果能够找出二者之间在细菌感染方面的联系,或者更进一步,能够找到二者之间共同的致病细菌,进而研究其发病机制,那么,对于冠心病,尤其是伴有牙周炎的冠心病患者的预防和治疗,将能够起到重要的指导作用。因此,本实验拟采取real-time PCR的方法,从基因水平,研究二者之间的细菌学联系。目的1.对比伴有冠心病的牙周炎患者(即CAD~+牙周炎患者)和不伴有冠心病的牙周炎患者(即CAD~-牙周炎患者)两组之间的牙周指数有无差别;2.分析轻度、中度和重度牙周炎患者中同时伴有冠心病的患者各自所占比例有无差别;3.分析伴有冠心病的牙周炎患者(即CAD~+牙周炎患者)和不伴有冠心病的牙周炎患者(即CAD~-牙周炎患者)的龈下菌斑中,牙周常见致病细菌组份构成的区别,寻找特异性细菌,为冠心病的预防和治疗提供参考。方法1.随机抽取无冠心病史慢性牙周炎患者和冠心病合并慢性牙周炎患者,记录牙周指数:探诊深度(PD)、探诊出血(BOP)、附着丧失(AL),研究伴冠心病的牙周炎患者(即CAD~+牙周炎患者)和不伴有冠心病的牙周炎患者(即CAD~-牙周炎患者)之间牙周指数的关系;2.将所有受试的(牙周炎)患者按照牙周探诊深度(PD)和附着丧失水平(AL),分为轻度(PD≤4 mm,AL=1～2 mm)、中度(PD≤6 mm,AL=3～4mm)重度(PD＞6 mm,AL≥5 mm)三组,分析三组中冠心病患者所占比例的差别;3.采集龈下菌斑,采用实时定量聚合酶链反应(real-time PolymeraseChain Reaction,real-time PCR)方法,检测冠心病慢性牙周炎患者与单纯慢性牙周炎患者龈下菌斑中牙周炎五种常见致病细菌伴放线放线杆菌(Actinobacillusactinomycetemcomitans,A.a.)、牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g.)、中间普氏菌(Prevotella intermedia,P.i.)、福赛拟杆菌(Bacteroides forsythus,B.f.)和齿垢密螺旋体(Treponema denticola,T.d.)构成比例关系。结果1.CAD~+组牙周炎患者与CAD~-组牙周炎患者的牙周临床检查结果:探诊出血(BOP)、探诊深度(PD)、附着丧失(AL)情况为:两组间三个指标经统计学分析后,P值均＜0.05,差别具有统计学意义;2.按照牙周探诊深度(PD)和附着丧失水平(AL),将受试者分为轻度(PD≤4 mm,AL 1～2 mm)牙周炎、中度(PD≤6 mm,AL=3～4 mm)牙周炎和重度(PD＞6 mm,AL≥5 mm)牙周炎后,分析可得,三组中冠心病患者所占比例分别为轻度牙周炎患者组13.43%,中度牙周炎患者组51.85%,重度牙周炎患者组76.67%,经χ~2检验后,P＜0.05,三组之间存在具有统计学意义的差别;3.CAD~+组牙周炎患者与CAD~-组牙周炎患者的五种细菌检测结果:两组间细菌经ABI7500 real-time PCR仪扩增,并经ABI7500 system计数后,经统计学分析,牙龈卟啉单胞菌(P.g.)的P值＜0.05,具有统计学意义;伴放线放线杆菌(A.a.)、中间普氏菌(P.i.)、福赛拟杆菌(B.f.)及齿垢密螺旋体(T.d.)的计数经统计学分析后,P值＞0.05,不具有统计学意义。结论1.伴有冠心病的牙周炎患者,其牙周指数均较单纯牙周炎患者严重,提示牙周炎与冠心病之间存在某种联系;2.重度牙周炎患者冠心病发病率高,说明牙周炎是冠心病的危险因素;3.实验组和对照组的龈下菌斑在细菌检测分析后,CAD~+组的牙龈卟啉单胞菌(P.g.)明显高于CAD~-组,经统计学分析后,差别具有统计学意义,提示龈下菌斑中,P.g.含量高的牙周炎患者冠心病的发病高,即这种细菌在牙周炎影响冠心病方面具有重要意义。