【摘 要】
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该研究将Itk的PH结构域进行扩增,克隆入酵母双杂交系统的pLexA载体,转化酵母细 胞GEY48(p8op-lacZ),经检测,证实了PH结构域无自激活作用,且对酵母细胞无毒性作用.用PH结构域
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该研究将Itk的PH结构域进行扩增,克隆入酵母双杂交系统的pLexA载体,转化酵母细 胞GEY48(p8op-lacZ),经检测,证实了PH结构域无自激活作用,且对酵母细胞无毒性作用.用PH结构域作为"钓饵"蛋白,在酵母双杂交系统中筛选构建于ADf载体的T细胞cDNA文库.经营养缺陷选择、诱导筛选和进一步的鉴定确证,得到阳性克隆19个,取其中5个测序,得 到两种已知序列.为深入研究PH结构域及其结合蛋白对于Itk乃至T细胞功能的影响和意义,该研究同时将PH结构域编码基因与GST进行融合表达,并做表达形式分析,给PH结构域及其 结合蛋白的相互作用在其他系统中的验证,以及PH结构域功能奠定基础.
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