【摘 要】
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目的:探讨转染金属蛋白酶抑制剂-1(Tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)si RNA的成纤维细胞(fibroblasts,FB)在组织工程尿道中的应用效果。材料与方法:制备小肠
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目的:探讨转染金属蛋白酶抑制剂-1(Tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)si RNA的成纤维细胞(fibroblasts,FB)在组织工程尿道中的应用效果。材料与方法:制备小肠黏膜下基质(small intestinal submucosa,SIS),扫描电镜观察SIS结构特征。分离并扩增兔子口腔黏膜上皮细胞(oral keratinocytes,OK)和FB,将TIMP-1 si RNA转染FB,ELISA检测转染前后FB分泌I型胶原的变化。将OK和转染TIMP-1 si RNA的FB种植于SIS支架材料上。分别剥除24只雄性新西兰兔子(平均分为3组,每组8只)尿道构建尿道缺损模型(2.0×0.8cm),第1组采用单纯的SIS修复,第2组采用SIS复合OK修复,第3组采用SIS复合OK和转染TIMP-1 si RNA的FB修复。术后留置8号硅胶导尿管。在手术后的1个月和6个月(每组每月4只)行逆行尿道造影检查,并行组织病理切片,对不同组织标本中的修复重建效果进行分析。结果:ELISA检测发现转染TIMP-1 si RNA的FB较未转染的FB表达I型胶原明显降低。逆行尿道造影下,第1组有5只兔子尿道管腔通畅,第2组有6只兔子尿道管腔通畅,第3组有7只尿道管腔通畅。组织学上,第1组术后6个月时纤维化和炎症较明显,第2组和第3组纤维化和炎症较轻,且第3组尿道上皮、平滑肌及血管的生长速度较第2组快。结论:转染TIMP-1 si RNA可抑制FB内TIMP-1的表达,并可减少I型胶原的产生。转染TIMP-1 si RNA的FB可抑制尿道瘢痕的形成,可作为尿道组织工程的种子细胞用于尿道修复重建。
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