颗石藻Pleurochrysis carterae脂肪酸及色素成分的研究

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微藻细胞中含有丰富的生物活性物质,其中多不饱和脂肪酸和色素具有很多生理功能,值得开发利用。本文选取颗石藻Pleurochrysis carterae为原材料,研究了不同光照强度和不同温度培养条件对颗石藻P. carterae生长和脂肪酸合成的影响,同时研究了二苯胺对颗石藻P. carterae的生长、色素成分和脂肪酸的影响,为进一步研究颗石藻P. carterae脂肪酸的合成和类胡萝卜素的合成途径提供了一定的理论基础,为利用颗石藻开发生产DHA(二十二碳六烯酸)提供了一定的技术支持。其研究结果如下:1、低光(100μmol photons·m-2·s-1)不同温度(25℃、15℃)下,无氮和无磷培养时玻璃培养管中P. carterae细胞的生长速度均下降了,且细胞的颜色变浅。随着培养时间的延长,无氮培养下细胞内叶绿素a的含量一直下降,这说明无氮培养抑制了细胞内叶绿素a的合成。另外,无氮和无磷培养下,P. carterae细胞内DHA和总脂肪酸的合成并未受到诱导。低光不同温度(32℃、25℃)下,无氮和无磷培养对10L试剂瓶中P. carterae的生长有不同的影响。高温32℃下,由于培养时间较短,P. carterae细胞的生长速率和形态并没有明显的变化,但高温抑制了细胞内DHA和总脂肪酸的合成。25℃下,无氮和无磷培养下细胞生长缓慢,尤其是无氮培养时,细胞生物量很低,藻液和细胞均呈浅黄色。同时25℃下,P. carterae细胞内DHA和总脂肪酸占干重的百分比均下降了。2、高光(230μmol photons·m-2·s-1)不同温度(31℃、28℃、18℃)下,P. carterae细胞在无氮和无磷培养下的生长趋势类似。无氮培养下细胞的生长速率很低,且在培养期间细胞内叶绿素a的含量一直下降。无磷培养下细胞生长速率有所下降,但细胞内叶绿素a的含量一直上升。高光不同温度下,无氮和无磷培养对细胞内脂肪酸组成的影响相似。C18:1n9(油酸)在细胞内大量累积,无氮培养能诱导细胞内总脂肪酸的累积,却抑制了DHA的合成。3、初步确定了颗石藻P. carterae中主要的黄色色素为岩藻黄素,另外发现有一种吸收紫外光的色素,在228nm处有最大的吸收峰,推测可能是八氢番茄红素。10μM的二苯胺对P. carterae细胞的生长没有显著影响,却能抑制细胞内岩藻黄素的合成,诱导吸收紫外光的色素大量积累,依此推测此吸收紫外光的色素是岩藻黄素的合成前体。另外发现用二苯胺处理颗石藻P. carterae后,细胞内的总脂肪酸含量略有下降,C18:1n9(油酸)大量积累,18:3n3(α-亚麻酸)、18:3n6(γ-亚麻酸)和DHA都有不同程度的下降。此结果说明二苯胺抑制C18:1进一步转化成其它脂肪酸。
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