痤疮消方系江苏省中西医结合医院皮肤科治疗痤疮的临床经验方,已有10余年的使用史,主要由大黄、栀子、蒲公英等5味药组成,具有清热解毒,化湿消肿,祛瘀散结之功效。临床上用“痤疮消”药液倒膜外用,对痤疮的炎症性皮疹如丘疹、脓疱等均有显著的疗效,但其使用及携带不便,制约了将其服务于更多的患者。本文在对痤疮消方化学成分表征的基础上对处方提取工艺、凝胶成型工艺及质量评价进行了研究,具体如下:1、文献研究本课题对痤疮的研究进展进行了深入剖析;对处方各味药中有效成分的理化性质、药理药效等方面的基础研究内容进行了归纳、总结;对中药复方物质基础研究和凝胶剂研究进展进行了综合分析。2、痤疮消方的UPLC-Q/TOF-MS化学成分分析本研究运用UPLC-Q/TOF-MS联用技术,根据色谱峰在质谱中的精确分子量、碎片信息、质谱裂解规律,结合标准品信息和参考文献,对痤疮消方及方中诸药的化学成分进行了分析,结果共鉴定了 59个化合物,其中30个来源于大黄,14个来源于栀子,7个来源于马齿苋,5个来源于蒲公英,3个来源于薄荷。通过比对痤疮消方洗剂透皮液与痤疮消方化学成分,发现透过皮肤的化合物共有21个,其中11个来源于大黄,多为蒽醌类化合物,7个来源于栀子,多为环烯醚萜苷类化合物,2个来源于薄荷,为黄酮类化合物橙皮苷、蒙花苷,1个来源于蒲公英,为苯丙酸类化合物咖啡酸。透皮化合物的鉴定为制剂的工艺研究及质量评价奠定了基础。3、提取工艺研究本研究根据痤疮消方透皮液UPLC-Q/TOF-MS分析结果,结合方中诸药活性成分的理化性质,将处方药物分为两部分分别提取。薄荷采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,该实验以挥发油提取量为评价指标,正交实验法优选薄荷油提取工艺为加10倍量水,浸泡60min,水蒸气蒸馏5小时。薄荷药渣与大黄、栀子、马齿苋、蒲公英采用乙醇提取,以大黄游离总蒽醌、栀子苷、咖啡酸含量的综合评分为指标,均匀设计实验法优选出最佳提取工艺为加入12倍量80%乙醇,提取3次,每次1小时。减压回收乙醇,与薄荷提取挥发油后的水液合并,减压浓缩、干燥,得痤疮消方提取物。4、提取物的理化性质研究中药复方提取物的理化性质对于药物的透皮性能有很大影响。本文以沉淀法和指标成分溶解量法研究痤疮消方提取物的平衡溶解度,以表观油水分配系数表征提取物的透皮性能。考察提取物的溶解度时,分别测定提取物整体的溶解度和栀子苷、大黄酸、大黄酚三个指标成分在不同溶剂和不同pH缓冲液中的溶解度,并测得三者在不同PBS缓冲体系中的油水分配系数,结果显示pH对于溶解度和油水分配系数有较大影响。5、痤疮消凝胶的制备工艺研究本研究首先以凝胶均匀性、涂展性、粘度、成膜性及稳定性为指标,采用单因素实验方法优选出凝胶基质为卡波姆。然后优选了基质溶胀方法、pH调节剂的选择、pH调节剂的加入顺序、保湿剂的选择等。在确定凝胶基质基本组成后,本研究运用均匀设计实验,以栀子苷、大黄酸和大黄酚的累积渗透药量Q及外观性状等理化性质的综合评分为评价指标,对卡波姆940用量、三乙醇胺量、甘油用量和载药量进行优化。综合分析实验结果及制备简便、制剂成本等影响因素后,确定痤疮消凝胶最佳处方为卡波姆940 1.05%,三乙醇胺1.5%,甘油25%,载药量为4.5%。透皮给药制剂大多要加入透皮吸收促进剂,本文从处方整体的透皮吸收速率出发,运用主成分分析法,以凝胶指纹图谱峰面积为评价对象,优选凝胶的透皮吸收促进剂,单因素实验结果显示,累积渗透药量Q最大的促进剂为2.5%氮酮和2.5%丙二醇组成的二元促进剂。6、初步质量评价研究(1)定量研究:本研究选择方中主要药味大黄、栀子中主要活性成分游离蒽醌和栀子苷为质量控制指标,建立了高效液相含量测定方法,方法学考察表明所建立的方法操作简便、准确,精密度、稳定性、重现性均较好。采用建立的方法对三批样品进行了含量测定,并规定了最低限量。(2)定性研究:本研究建立了处方中大黄、栀子、薄荷、马齿苋、蒲公英的薄层鉴别方法,专属性强,重现性好,为痤疮消凝胶的定性鉴别提供了依据。所建立的质量评价方法能较好地控制该产品的质量。总之,本研究通过UPLC-Q/TOF-MS化学成分分析,初步确定了痤疮消方透皮药效物质基础,在此基础上进行了制备工艺及质量评价研究,为将该方开发成工艺可行、质量可控、携带便利的现代中药制剂提供了实验依据。