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口蹄疫病毒(Foot and Mouth Disease Virus,FMDV)分为7个血清型:A、O、C、Asia l、SAT1、2、3。其中,南非型(Southern Africa Territories,SAT)口蹄疫具有明显的地域性,主要集中在撒哈拉沙漠以南,侵害水牛及其他偶蹄动物。近几年的报告表明,中东地区暴发了南非2型口蹄疫(SAT2 FMD),跨越了长久以来的地域界限,存在进入我国的风险,给我国的养殖业造成了潜在的威胁。我国在SAT2 FMDV方面的研究较少,了解其蛋白结构与抗原表位对研制储备疫苗具有重要意义。本研究参考相关文献,选择了SAT2 FMDV(PAT/1/2012,GenBank:JX014256)结构蛋白VP1上编码的B细胞表位(VYTKAAAAIRGDRAALAAKYADTNHTLPPTFNF GYVTVDK)和T细胞表位(NVQEGRRKHTDVAFLLDRST),为设计SAT2 FMDV表位疫苗奠定了基础。猪细小病毒(Porcine Parvovirus,PPV)能导致初产母猪及血清学阴性的经产母猪发生流产、不孕、产死胎、木乃伊胎及弱仔等。在猪群里的检出率高达85%,对我国养猪业造成巨大的损失。VP2蛋白占PPV衣壳的80%以上,能够独立形成病毒颗粒。VP2表面有4个Loop环,可以携带外源表位组装成嵌合型病毒样颗粒(Virus-like Particles,VLPs),诱导机体同时产生针对PPV和嵌入表位的特异性抗体和相关细胞因子。本研究欲将选择的SAT2 FMDV抗原表位嵌入在PPV VP2蛋白不同位点,组装成不同形式嵌合型VLPs,并期望其免疫动物后能达到双重效果。本研究首先使用Bac-to-Bac系统构建含有PPV AV30毒株优化后的VP2蛋白编码基因的重组杆状病毒,感染sf9和HF细胞后表达了VP2蛋白,分子质量约为64 KDa。透射电镜(Transmission Electron Micrograph,TEM)观察,VP2蛋白组装成VLPs(命名为VP2-VLPs),与纯化的PPV AV30病毒颗粒大小形状相似。将其免疫BALB/c小鼠,能刺激小鼠产生抗PPV的特异性抗体。小鼠脾脏淋巴细胞在PPV AV30刺激后,出现了显著增殖。血清中检测到了细胞因子:IL-2、IL-4和IFN-γ。进而利用生物信息学模拟嵌入表位对VP2蛋白结构的影响,最终确定了VP2蛋白上3个位点:N端和Loop2区内以及Loop4区后,设计的嵌合蛋白分别命名为:L2B、NT1L2B、NT1L2B4B、N(T1)2L2B4B。将嵌合蛋白编码基因构建到载体pFastBacTMDual上,Western Blot及IFA实验分析表明,重组嵌合蛋白在HF细胞中表达,嵌入表位能被特异性抗体识别。TEM显示四种重组嵌合蛋白都能自我组装成VLPs,与VP2-VLPs大小形状相似。本研究成功制备了含有SAT2 FMDV抗原表位的嵌合型VP2-VLPs,这将为研制SAT2 FMD储备疫苗奠定了基础,并期望达到同时预防PPV和SAT2 FMDV的目的。