目的： 研究AECA对内皮细胞凋亡和分泌细胞因子的影响，探讨AECA损伤内皮细胞的机制，进一步验证α-烯醇化酶是AECA识别的自身抗原之一。 方法： 以EA.hy926细胞提取物蛋白为抗原，免疫印迹法检测并筛选47kD-AECA强阳性患者血清，G蛋白亲和层析法纯化IgG，用纯化蛋白体外诱导内皮细胞凋亡，应用荧光显微镜及流式细胞仪检测细胞凋亡，并观察重组抗原(α-烯醇化酶)对凋亡的阻断作用；应用ELISA法检测含47kD-AECA IgG体外作用于内皮细胞后，上清液中IL-6的水平。 结果： 1．含47kD-AECA IgG体外可诱导内皮细胞凋亡，经Hoechst 33342染色后荧光显微镜下可见明显的核形态变化及典型的凋亡小体； 2．800gg/ml含47kD-AECA SLE IgG分别作用于EA.hy926细胞24、48和72小时后，凋亡率分别为5.59％、11.4％和50.2％，48及72小时后出现较明显的亚G1凋亡峰，此时的凋亡率明显高于加入相同剂量正常人IgG的内皮细胞凋亡率(分别为2.71％、2.24％和4.27％)；而同时加入相同剂量经重组α-烯醇化酶预处理的含47kD-AECA IgG，内皮细胞的凋亡率明显降低(分别为2.32％、7.60％和8.58％)。 3．含47kD-AECA IgG作用于EA.hy926细胞8小时后，Annexin V<+>细胞数明显增加，并随IgG作用时间和浓度的增加而升高，提示AECA可诱导膜磷脂酰丝氨酸(PS)外翻表达于细胞表面； 4．800gg/ml含47kD-AECA的4例患者IgG作用于EA.hy926细胞 24小时后，Annexin V<+>细胞分别为21.1％、17.9％、16.6％、24.2％，明显高于正常对照组的Annexin V<+>细胞(6.04％)；而800μg/ml经重组α-烯醇化酶预处理的含47kD-AECA IgG作用于EA.hy926细胞24小时后，Annexin V<+>细胞有所减少，分别为12.0％、10.7％、11.3％、10.1％；提示重组α-烯醇化酶可部分阻断含47kD-AECA体外诱导内皮细胞凋亡的作用。 5．不同浓度含47kD-AECA IgG作用于EA.hy926细胞24小时后，上清液中IL-6平均水平较正常对照组明显升高，分别为16.09 vs 5.297 pg/ml(200ug/ml IgG)、24.59 vs 6.278 pg/ml(400ug/ml IgG)、 34.73 vs 8.049 pg/ml(600ug/ml IgG)、48.55 vs 8.484 pg/ml(800ug/ml IgG)，且随IgG浓度增加呈上升趋势；提示AECA体外可促使内皮细胞分泌IL-6增加，并呈现浓度相关性。 结论： 1．AECA体外可诱导内皮细胞凋亡，早期可出现细胞膜的结构成分磷脂酰丝氨酸(PS)的暴露。 2．AECA体外可促使内皮细胞分泌促炎症细胞因子IL-6，引起内皮细胞损伤。 3．重组α-烯醇化酶可部分阻断47kD-AECA体外诱导内皮细胞凋亡的作用，α-烯醇化酶是AECA识别的自身抗原之一。