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苎麻是一种传统而优良的韧皮纤维材料,但其工业应用受到脱胶工艺的限制。RAMCD407是专门为苎麻沤麻经过多年驯化获得的高效脱胶微生物菌群,而其脱胶机制尚不清楚。苎麻胶质可能是一种有用的资源,但从未得到证实。本文构建了FLSM研究苎麻纤维的方法体系,综合运用OM、PLM、FLSM、SEM等显微成像技术,结合酶活力跟踪分析,阐明了RAMCD407菌群脱胶的形态学和酶学过程。探索了从沤麻液中回收果胶酶、果胶和木聚糖的方法,并对回收物质进行了分析表征。
(1)经过参数优化,确定曝光时间为200ms、增益为1.0x、γ值为1.00时,FLSM能稳定检测到苎麻木聚糖发出的靛蓝色荧光。
(2)RAMCD407菌群能在56h内完成沤麻,生物脱胶后的纤维经过0.2%NaOH处理,残胶率为2.84%,断裂强度为5.2cN/dtex,达到了苎麻纺纱要求。
(3)形态学和酶学分析表明,RAMCD407菌群沤麻包括主要四个过程:吸水和草酸钙晶体(CCCO)形成;皮层组织脱离;胞间层的胶质去除;纤维表面的胶质清除。前两个过程在较低酶活环境下完成,完成第三个过程时伴随较高的果胶酶活力,完成最后一个过程时伴随较高的果胶酶和木聚糖酶活力。在这个过程中,胶质以块状形式剥离,因此只需要降解少量的果胶和半纤维素即可释放出纤维,果胶酶起着主要作用,木聚糖酶起着次要但不可或缺的作用。
(4)在沤麻初始阶段形成的CCCO扮演了物理脱胶的角色,他们像一枚枚的楔子,嵌入皮层组织中,使皮层组织呈块状剥落。
(5)在沤麻过程中产生了具有双壳结构的球形颗粒,FLSM分析表明,其外壳富含木聚糖。
(6)通过过滤,离心和酸处理,从10L沤麻液中回收了2.14g果胶颗粒和27.67g木聚糖片层,相当于原麻中3.96%的果胶和25.30%的木聚糖被回收。超滤浓缩结合75%(NH4)2SO4盐析可从沤麻液中回收果胶酶,再经HiTrapDEAEFF离子交换柱纯化后,获得纯的果胶酶,SDS-PAGE凝胶电泳测分子量为55kDa。在这个过程中,纯化了2.12倍,相对于透析液中果胶酶的回收率为25.63%,活力达到了95.04U/mL。
(1)经过参数优化,确定曝光时间为200ms、增益为1.0x、γ值为1.00时,FLSM能稳定检测到苎麻木聚糖发出的靛蓝色荧光。
(2)RAMCD407菌群能在56h内完成沤麻,生物脱胶后的纤维经过0.2%NaOH处理,残胶率为2.84%,断裂强度为5.2cN/dtex,达到了苎麻纺纱要求。
(3)形态学和酶学分析表明,RAMCD407菌群沤麻包括主要四个过程:吸水和草酸钙晶体(CCCO)形成;皮层组织脱离;胞间层的胶质去除;纤维表面的胶质清除。前两个过程在较低酶活环境下完成,完成第三个过程时伴随较高的果胶酶活力,完成最后一个过程时伴随较高的果胶酶和木聚糖酶活力。在这个过程中,胶质以块状形式剥离,因此只需要降解少量的果胶和半纤维素即可释放出纤维,果胶酶起着主要作用,木聚糖酶起着次要但不可或缺的作用。
(4)在沤麻初始阶段形成的CCCO扮演了物理脱胶的角色,他们像一枚枚的楔子,嵌入皮层组织中,使皮层组织呈块状剥落。
(5)在沤麻过程中产生了具有双壳结构的球形颗粒,FLSM分析表明,其外壳富含木聚糖。
(6)通过过滤,离心和酸处理,从10L沤麻液中回收了2.14g果胶颗粒和27.67g木聚糖片层,相当于原麻中3.96%的果胶和25.30%的木聚糖被回收。超滤浓缩结合75%(NH4)2SO4盐析可从沤麻液中回收果胶酶,再经HiTrapDEAEFF离子交换柱纯化后,获得纯的果胶酶,SDS-PAGE凝胶电泳测分子量为55kDa。在这个过程中,纯化了2.12倍,相对于透析液中果胶酶的回收率为25.63%,活力达到了95.04U/mL。