本文主要确证了二甲双胍的一种HPLC测定血清药物浓度的方法,并使用该方法研究了vitamin D3(VD3)对二甲双胍药代动力学的影响。目的：确证一种文献报道的二甲双胍HPLC测定方法；确认VD3对小鼠二甲双胍药代动力学有无影响方法：1.方法学确证乙腑是常用的去除生物样品中蛋白质的试剂,选取各两个血清样品,分别加入两倍和三倍体积乙腈处理。以考马斯亮蓝法检测样品残留蛋白质含量,验证乙腈的除蛋白效果。配制梯度浓度二甲双胍生理盐水及血清青溶液,在选定的色谱条件下进行HPLC测定,建立二甲双胍标准曲线,考查线性及定量范围。配制100、500.1000μg/mL二甲双胍血清样品以及空白血清样品,HPLC测定,计算日内精密度,日间精密度和回收率并比较二甲双胍样品及血清样品的图谱。分别测定冻存3天以及沉淀剂处理后冻存7天二甲双胍样品,考查其冻存稳定性。2.VD3对小鼠二甲双胍药代动力学的影响分别测定80、240、720mg/kg剂量灌胃给药组小鼠不同时间点的血药浓度,进行药动学分析。分别测定经200、600、1800IU/kg剂量VD3灌胃处理14天,并于第15天灌胃给以三个剂量二甲双胍给药组小鼠不同时间点的血药浓度,进行药动学分析。分别测定80mg/kg剂量尾静脉注射组以及200IU/kg剂量VD3灌胃处理14天,并于第15天尾静脉注射给以80mg/kg剂量二甲双胍给药组不同时间点的血药浓度,进行药动学分析。结果：1.采用两倍乙腈时,两个样品的蛋白质残留量平均为10而采用三倍体积乙腈时,两个样品的蛋白残留量平均为-0.5μg/mL。二甲双胍生理盐水及血清标准曲线的测定结果显示,二甲双胍在0.25至1000μg/mL范围具有良好线性,拟合方程的相关性良好,R2>0.99。低、中、高三个浓度样品日内变异系数分别为2.23%、1.33%和0.73%,日间变异系数分别为3.79%、1.97%和1.80%,回收率分别为113.58%、105.05%和99.59%。冻存3天及沉淀剂处理后的样品冻存7天,回收率变化在15.43%范围内,提示样品在实验保存条件下稳定性良好。2.药动学分析得到各给药组药时曲线及主要药动学参数。无前处理时,二甲双胍80、240、720mg/kg剂量灌胃给药消除半衰期t1/2β分别为289.476、238.169、276.627min;表观分布容积Vd分别为24.950、28.132、31.731L/kg；清除率CL分别为0.060、0.082、0.080L/min/kg;峰值浓度Cmax分别为4.35、15.28、27.19mg/L; AUC0-∞分别为1339.087、2931.336、9055.721mg/L*min。80mg/kg剂量静注给药消除半衰期t1/2p为153.349min；表观分布容积Vd为17.282L/kg;清除率CL为0.028L/min/kg;AUC0-∞为2890.478mg/L*min。80mg/kg剂量灌胃给药生物利用度F为46.33%。VD3低剂量前处理后,二甲双胍80、240、720mg/kg剂量灌胃给药消除半衰期t1/2β分别为202.455、211.363、390.808min;表观分布容积Vd分别为18.226、27.573、51.711L/kg;清除率CL分别为0.062、0.090、0.092L/min/kg;峰值浓度Cmax分别为6.34、15.64、36.40mg/L; AUC0-∞(?)分别为1282.057、2654.163、7850.301mg/L*min。80mg/kg剂量静注给药消除半衰期t1/2β为108.752min;表观分布容积Vd为16.011L/kg;(?)清除率CL为0.035L/min/kg; AUC0-∞为2288.313mg/L*min。80mg/kg剂量灌胃给药生物利用度F为56.03%。VD3中剂量前处理后,二甲双胍80、240、720mg/kg剂量灌胃给药消除半衰期t1/2β分别为134.042,347.953,336.691min;表观分布容积Vd分别为10.227、30.363、49.526L/kg;清除率CL分别为0.053、0.060、0.102L/min/kg;峰值浓度Cmax分别为8.27、17.96、24.91mg/L; AUC0-∞分别为1512.791、3967.899、7061.600mg/L*min。VD3高剂量前处理后,二甲双胍80、240、720mg/kg剂量灌胃给药消除半率期t1/2β分别为380.393、290.440、265.282min；表观分布容积Vd分别为23.983、19.917、26.509L/kg；清除主CL分别为0.044、0.048、0.069L/min/kg;峰值浓度Cmax分别为5.53、19.19、35.62mg/L；AUCo-∞分别为1830.628、5049.019、10394.75mg/L*min。结论：1.研究中所采用的测定方法可靠。能够满足二甲双胍药动学的研究。2.二甲村出胍的药动学特征符合二室模型,以一级动力学消除,VD3前处理后仍符合此特征。本研究初步表明VD3对二甲双胍代谢及消除影响不大,但在用高剂量二甲双胍口服给药后,低、中剂量VD3可能对二甲双胍的吸收和分布有一定的影响。