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本文以夏枯草及橘皮多糖为研究对象,对其提取和分离纯化工艺、各组分的理化特性及体外抗氧化活性进行了系统研究。主要研究内容如下:(1)在单因素试验的基础上,利用响应曲面法对夏枯草多糖的酶解提取工艺进行了优化,得到最佳提取条件:复合酶添加量(纤维素酶浓度0.4%、果胶酶浓度0.8%、木瓜蛋白酶浓度0.8%)、pH 6.2、提取温度61℃、提取时间60 min,在此条件下夏枯草粗多糖(PLs)提取得率为11.57±0.48%(n=3);对橘皮多糖的微波辅助提取工艺进行了优化,得到最佳提取条件:微波功率704 W,提取温度52℃,提取时间41 min,在此条件下橘皮粗多糖(TPPs)的提取得率为19.86±0.23%(n=3)。(2)得到的PLs-3-1和TPPs分别用40%、60%、80%乙醇进行了分级沉化,Sevag法除蛋白质,蒸馏水透析除去小分子,采用离子交换凝胶柱层析和分子筛凝胶柱层析对PLs和TPPs进行分离和纯化,得到夏枯草纯化多糖(PLs-3-1)和橘皮纯化多糖(TPPs-2-1)。(3)利用凝胶渗透色谱(HPGPC)测定PLs-3-1和TPPs-2-1重均分子量分别为8.36×105Da和1.78×104Da,凝胶色谱图形尖锐且对称性良好,证明两种多糖都是高纯度均一多糖。高效液相色谱(HPLC)测定PLs-3-1由鼠李糖(Rha)、阿拉伯糖(Ara)、木糖(Xyl)、甘露糖(Man)、半乳糖(Gal)、葡萄糖(Glc)6种单糖组成,摩尔比(%)为1.58:34.5:56.31:1.72:4.28:2.05。TPPs-2-1单糖种类主要为Man(4.15%)、Rha(6.9%)、半乳糖醛酸(GalA)(42.47%)、Glc(3.48%)、Ara(13.8%)、葡萄糖醛酸(GlcA)(18.2%)和Gal(11%)。红外光谱(IR)和核磁共振谱图(NMR)也显示PLs-3-1和TPPs-2-1具有多个糖类物质的特征吸收峰。(4)抗氧化实验证明:夏枯草和橘皮多糖均具有清除有机自由基(DPPH·)、羟基自由基(·OH)和超氧自由基(O2-·)的活性,其中PLs-3-1在浓度为2.0 mg/m L时,·OH清除率达到81.62%,DPPH·清除率达82.6%;TPPs-2-1在2.0 mg/mL浓度时对DPPH·清除率达到84.5%,对·OH的清除率64.7%,甚至高于同等浓度下的抗坏血酸(Vc)。两种多糖都具有FRAP值和显著的?OH、DPPH·和O2-·清除能力,清除能力随着多糖浓度升高而增强,并呈明显的量效关系,但当浓度超过一定值时,再增高浓度清除能力增加的速率会降低。PLs-3-1和TPPs-2-1的抗氧化活性的不同是由其单糖组成、分子量和提取方法等多种因素影响的。上述结果表明两种多糖具有较强的抗氧化作用,在功能食品和医药行业中具有进一步开发的潜力。