【摘 要】
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目的:探究胞吐作用相关蛋白Secemin1（SCRN1）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达及其通过PI3K/AKT信号通路对OSCC细胞生物学特性的影响。方法:（1）用生物信息学方法分析SCRN1在各系统肿瘤组织及其癌旁组织中的表达差异,再用免疫组织化学法（IHC）验证SCRN1在OSCC临床病理标本及其癌旁组织中的表达差异,继而用Westernblot（WB）法检测SCRN1在人正常口腔角质形
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目的:探究胞吐作用相关蛋白Secemin1（SCRN1）在口腔鳞状细胞癌（OSCC）中的表达及其通过PI3K/AKT信号通路对OSCC细胞生物学特性的影响。方法:（1）用生物信息学方法分析SCRN1在各系统肿瘤组织及其癌旁组织中的表达差异,再用免疫组织化学法（IHC）验证SCRN1在OSCC临床病理标本及其癌旁组织中的表达差异,继而用Westernblot（WB）法检测SCRN1在人正常口腔角质形成细胞株（NOK）与OSCC细胞株（CAL27、SCC25、HSC3、UM1、FaDu）中的表达水平。（2）选取2株高表达SCRN1的OSCC细胞株,用慢病毒沉默SCRN1基因,再选取2株低表达SCRN1的OSCC细胞株,用慢病毒使SCRN1基因过表达,并用荧光显微镜、WB和逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法验证病毒转染成功;继而用细胞增殖实验（CCK8法）、平板克隆实验、Transwell侵袭实验和划痕实验来检测SCRN1表达变化对OSCC细胞增殖、克隆形成、侵袭和迁移能力的影响。（3）用WB法检测沉默或过表达SCRN1对PI3K/AKT信号通路及其下游标记物E-cadherin、N-cadherin和Vimentin表达水平的影响。结果:（1）OSCC组织中SCRN1蛋白和mRNA水平显著高于癌旁组织;OSCC细胞株中的SCRN1表达水平均显著高于人正常口腔角质形成细胞株。（2）OSCC细胞株在沉默SCRN1基因后,其增殖、克隆形成、侵袭和迁移能力显著降低;OSCC细胞株在过表达SCRN1基因后,其增殖、克隆形成、侵袭和迁移能力显著增强。（3）OSCC 细胞株在沉默 SCRN1 基因后,其total-PI3K、total-AKT表达水平无显著变化,p-AKT、N-cadherin和Vimentin表达水平显著下降,E-cadherin表达水平显著增高;OSCC细胞株在过表达SCRN1基因后,其 total-PI3K、total-AKT 表达水平无显著变化,p-AKT、N-cadherin 和Vimentin表达水平显著增高,E-cadherin表达水平显著降低。结论:（1）与正常组织及细胞相比,SCRN1在OSCC组织及细胞株中表达均增高,提示其升高表达可能与OSCC的发生发展有关。（2）SCRN1在OSCC细胞株中的表达变化对其增殖、克隆形成、侵袭及迁移能力均能产生显著影响。（3）SCRN1表达变化可影响PI3K/AKT信号通路的激活,并对其下游EMT相关蛋白N-cadherin、Vimentin和E-cadherin的表达水平产生显著影响,提示SCRN1对OSCC生物学特性的影响,可能与PI3K/AKT信号通路的异常激活及其诱导的EMT进展有关。
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