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目的：探讨DADA(复方二氯醋酸二异丙胺注射液；肝乐)对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis；SAP)大鼠肝脏细胞凋亡指数及Bcl-2、细胞色素C及Fas基因表达的影响,以及其对ALT (Aspertate aminotransferase；ALT；谷草转氨酶)、AST(Alanineaminotransferase；AST；谷丙转氨酶)及胆红素的影响,探讨DADA对重症胰腺炎肝脏损伤的保护机制。方法：雄性SD大鼠78只,体重250g-300g,随机分为正常组(N组),假手术组,重症急性胰腺炎模型组(SAP组),肝乐治疗组(DADA组)。胰腺炎组采用5%牛磺胆酸钠1ml/kg(注射速度0.2m1/min)逆行胰胆管注射方法复制大鼠重症急性胰腺炎模型,造模成功以后再随机分为SAP组和DADA组,假手术组开腹后翻动肠壁即关腹。术后禁食,清醒后自由进水。DADA组大鼠在模型制备成功后10min开始给予肝乐注射液(0.357mL/kg/12h)尾静脉注射；SAP组大鼠采用同样方法给予等量的生理盐水。于12h、24h、48h、72h时间点每组分别处死各组大鼠；对各组大鼠胰腺损伤、肝脏损伤进行大体形态和光镜下观察,并行肝脏组织病理评分；全自动生化分析仪测定大鼠血清AMY(amylase;血清淀粉酶)、AST.ALT.DBIL(Direct bilirubin;直接胆红素)、TBIL(Total bilirubin;总胆红素)、IBIL(Indirect bilirubin;间接胆红素)；用TUNEL法测定肝脏细胞凋亡指数,SABC免疫组化染色法测定肝脏Bcl-2、Fas、细胞色素C基因表达。所有结果均用SPSS13.0软件分析,行方差分析。结果：1、胰腺组织病理改变：(1)胰腺大体形态上改变,各时间点的正常组及假手术组大鼠胰腺形态均未见明显异常。SAP 12h组大鼠胰腺颜色紫暗,腹腔内有明显的腹水,但腹水量少,胰腺充血水肿明显,并且可见局部的胰腺组织出血、坏死；24h组大鼠胰腺呈灰褐色,腹腔内可见大量腹水,胰腺与周围脏器有部分的粘连,并可见粘连处的胰腺组织有片状的出血、坏死；48h组大鼠胰腺呈明显的灰褐色,腹腔内可见大量的血性腹水,胰腺与周围脏器有大面积的粘连,粘连处的胰腺组织有广泛的出血、坏死；72h组大鼠腹腔内可见大量的血性恶臭腹水,胰腺组织周围肠管严重淤胀,胰腺呈明显的灰褐色,胰腺与周围脏器有大面积的粘连,并可见粘连处的胰腺组织有大面积的出血、坏死及坏死灶内的钙化灶。DADA组各时间点大鼠虽然同样可以见到腹腔内不同程度的腹水,胰腺颜色变淡甚至紫暗,胰腺与周围脏器粘连,粘连处的胰腺组织有出血、不同程度的坏死等结构改变,但程度较SAP组对应时间点大鼠胰腺组织大体形态改变明显减轻。(2)光镜下胰腺组织结构改变：正常组及假手术组各时间点大鼠胰腺组织结构光镜下结构保持完整,胰腺间质内无炎细胞浸润及其他病理改变。SAP 12h组可见胰腺组织的叶间隔、小叶间隔及胰腺腺泡间隔增宽,部分的胰腺小叶结构紊乱,胰腺腺泡细胞肿胀,胰腺的腺泡间隔内可见炎细胞浸润,胰腺组织有灶性出血、坏死；24h组部分正常的胰腺小叶结构消失,胰腺腺泡细胞严重肿胀,胰腺腺泡间隔内可见大量的炎细胞浸润,胰腺组织有片状出血、坏死；48h组胰腺正常的小叶结构消失,胰腺腺泡细胞极度肿胀,腺泡间隔内可见大量的炎细胞浸润,胰腺组织可见广泛出血、坏死；72h组胰腺组织正常的小叶结构消失,胰腺腺泡细胞极度肿胀,胰腺腺泡间隔内可见大量的炎细胞浸润,胰腺组织内可见广泛的出血、坏死,坏死区内可见明显的钙化灶。DADA组大鼠光镜下胰腺组织同样可见胰腺小叶结构紊乱,间质内炎细胞浸润,胰腺腺泡细胞肿胀,并可见不同程度的胰腺组织出血、坏死等病理改变,但其程度较SAP组对应时间点的胰腺组织有改变明显的减轻。2、肝脏组织结构病理改变及肝脏组织病理学评分：(1)大体形态改变,各时间点N组及假手术组大鼠肝脏大体形态均未见明显的异常。SAP组12h时见肝脏体积略增大,包膜正常；24h时见肝脏体积增大,包膜紧张,与胰腺有少许的粘连；48h时见肝脏体积增大,包膜紧张,颜色稍淡,与胰腺粘连明显,可见粘连部位肝脏组织坏死；72h时见肝脏体积明显增大,包膜紧张,颜色明显变淡,与胰腺粘连较重,与胰腺粘连部位肝脏组织明显坏死。DADA组12h时肝脏大体形态与SAP组12h时无明显差异；24h时肝脏体积增大；48h时肝脏体积增大,包膜略紧张,少数与胰腺组织粘连,粘连处可见点片状的肝脏组织坏死。72h时肝脏体积增大,包膜略紧张,与胰腺组织粘连明显,粘连处可见明显的肝脏组织坏死灶,但较SAP组明显的减轻。(2)光镜下观察肝脏组织结果改变：N组及假手术组大鼠各时间点肝脏组织形态未见明显的异常。SAP组12h时肝细胞轻度水肿,细胞间隙增宽；24h时肝细胞肿胀加重伴炎性细胞浸润改变,脂肪变少数有红细胞淤积；48h时可见局灶性或不规则片状肝细胞坏死,肝窦及汇管区周围大量炎性细胞浸润及大量红细胞；72h时可见较大面积的局灶性或不规则片状肝细胞坏死,肝窦及汇管区周围大量炎性细胞浸润及红细胞。DADA各组仍可肝细胞的肿胀、炎细胞的浸润及区域的肝细胞坏死等改变,但程度较SAP组减轻。(3)组织病理学评分：假手术组、SAP组、DADA组大鼠肝脏组织病理学评分12h时SAP组高于假手术组(P<0.05), DADA组与SAP组无明显差异(P>0.05)；24h、48h、72h时分别为SAP组高于假手术组(P<0.05), DADA组低于SAP组(P<0.05)；72h时达到高峰。3、AMY、AST、胆红素于各时间点假手术组无明显的改变,SAP组、DADA组各时间点较假手术组明显的升高(P<0.05), DADA组低于SAP组(P<0.05)。4、肝脏细胞凋亡指数、Fas、细胞色素C基因表达各时间点假手术组无明显的改变(P>0.05),SAP组、DADA组各时间点较假手术组明显的升高(P<0.05), DADA组低于SAP组(P<0.05)。Bcl-2基因表达各时间点假手术组无明显的改变,SAP组、DADA组各时间点较假手术组明显的降低(P<0.05), DADA组高于SAP组(P<0.05)。结论：1、DADA对大鼠胰腺肝脏损害具有保护作用,可能为临床急性胰腺炎肝脏损伤的治疗提供新的途径。2、肝细胞凋亡在SAP肝细胞损伤的发病中起着重要的作用,而凋亡相关因子Bcl-2、Fas对肝细胞的凋亡起着调控作用。3、SAP早期给予DADA治疗对减少Fas的表达,增加Bcl-2的表达,改善肝细胞线粒体功能从而抑制肝细胞的过度凋亡减轻肝脏损害程度、改善预后是有益的。