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目的:心血管疾病目前已成为全球最主要的死亡原因,冠心病又是心血管疾病中最主要的死亡原因。经皮冠状动脉介入治疗为冠心病的重要治疗手段,然而支架术后的再狭窄却严重影响其远期疗效。血管平滑肌细胞增殖、迁移及表型转换是动脉粥样硬化、介入术后再狭窄等疾病的重要病理基础。研究表明,非选择性S1P1-5受体调节剂Fingolimod可以抑制PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞的增殖与迁移,而Hippo-YAP通路在血管平滑肌细胞增殖、迁移及表型转换中起重要作用。但关于选择性S1P1受体调节剂对血管平滑肌细胞增殖、迁移是否具有抑制作用?其作用机制是否与Hippo-YAP通路相关?目前尚不清楚。本研究旨在探讨选择性S1P1受体调节剂Cenerimod对PDGF-BB诱导的血管平滑肌细胞增殖和迁移的作用,并以Hippo-YAP通路为切入点探讨其作用的分子机制。方法:利用PDGF-BB(25ng/mL)诱导人主动脉血管平滑肌细胞(Human Aortic Smooth Muscle Cells,HASMC)和大鼠主动脉血管平滑肌细胞(Rat Aortic Smooth Muscle Cells,RASMC)建立平滑肌细胞增殖和迁移模型,并给予Cenerimod(7.5umol/L)处理,同步设置对照。利用CCK8法检测Cenerimod对PDGF-BB诱导的平滑肌细胞增殖的影响,利用Transwell法检测Cenerimod对PDGF-BB诱导的平滑肌细胞迁移的影响,利用RT-qPCR方法检测Hippo通路关键基因LATs和YAP的mRNA表达,Western blot法检测Hippo通路关键基因LATs1、pLATs1、YAP、pYAP、MCP-1、CyclinA1及P21的蛋白表达情况或磷酸化水平。利用生物信息学预测与YAP启动子区域结合的转录因子,Western blot法分别检测HASMC和RASMC中Cenerimod对YAP及预测转录因子蛋白表达的影响,利用转录因子siRNA干扰转录因子表达后,通过RT-qPCR和Western blot检测转录因子干扰对YAP m RNA及蛋白表达的影响。结果:细胞增殖实验发现,Cenerimod能明显抑制PDGF-BB诱导的人主动脉平滑肌细胞增殖(P<0.01);Transwell实验发现Cenerimod能降低PDGF-BB诱导的人主动脉平滑肌细胞的迁移能力(P<0.01);RT-qPCR检测发现,Cenerimod能下调PDGF-BB诱导的LATs1m RNA和YAP m RNA表达水平升高(P<0.05);Western blot检测发现,Cenerimod显著下调PDGF-BB诱导的HASMCs中LATS1、pLATS1、YAP和pYAP蛋白的表达水平(P<0.05),下调PDGF-BB诱导的HASMCs中MCP-1和CyclinA1的表达水平(P<0.01),上调PDGF-BB诱导的HASMCs中P21及pP21水平(P<0.01)。通过生物信息学预测发现,TBP、c-Jun和P53可能为YAP的转录因子;Western Blot检测发现,Cenerimod作用后,HASMC细胞核内YAP、TBP、c-Jun及P53蛋白的表达下降(P<0.01);RASMC细胞中总YAP蛋白以及相关目标转录因子蛋白(TBP、c-Jun及P53)的表达水平显著下降(P<0.001);RT-qPCR和Western blot检测发现,转染TBP siRNA至RASMC后,NC siRNA组YAP mRNA和蛋白表达水平与对照组相似(P>0.05);TBP siRNA组YAP mRNA和蛋白表达水平明显低于NC siRNA组(P<0.01);TBP si RNA组YAP mRNA和蛋白表达水平明显高于Cenerimod组(P<0.0001和P<0.05);RT-qPCR和Western blot检测发现,转染Jun siRNA至RASMC后,NC siRNA组YAP mRNA和蛋白表达水平与对照组基本相当(P>0.05);Jun siRNA组YAP mRNA和蛋白表达水平明显低于NCsiRNA组(P<0.01);Jun siRNA组YAP mRNA和蛋白表达水平略高于Cenerimod组(P<0.05)。结论:新型高选择性S1P1受体调节剂Cenerimod能降低Hippo-YAP通路关键因子LATS和YAP的表达,以阻断Hippo-YAP通路,抑制PDGF-BB诱导的VSMCs的增殖及迁移;Cenerimod可能通过活化P21,下调MCP-1及Cyclin A1表达,抑制人血管平滑肌细胞增殖和迁移。Cenerimod下调血管平滑肌细胞中YAP及转录因子TBP、c-Jun和P53蛋白表达,转录因子TBP和c-Jun可能参与调控Cenerimod对YAP表达的抑制作用。