研究目的及内容:胰腺癌是一种常见的消化系统肿瘤,其恶性程度高,预后差,5年生存率仅为3%～6%,是名副其实的“癌中之王”。在中国,近20年来胰腺癌发病率增长了将近6倍,居恶性肿瘤死亡率的第6位。胰腺癌(PC)患者的预后差异很大。根治性切除和化疗均可影响患者的预后。我们针对经病理确诊为胰腺癌并且行根治性切除及术后规范性化疗的患者,进行循环肿瘤DNA(ctDNA)中KRAS突变是否可以独立于其他临床病理因素预测胰腺癌患者的疾病进展和生存期的研究,探讨ctDNA KRAS突变是否可作为标志物,帮助医师筛选出接受根治性切除及规范化疗后预后较差的人群。研究方法:1.样本收集与临床资料的收集:本研究招募了2016年3月至2017年3月就诊于天津医科大学肿瘤医院胰腺肿瘤科的61例胰腺癌患者进行研究且患者均接受根治切除术及术后以吉西他滨为基础的规范辅助化疗。在EDTA试管中,进行外周血样的采集,以进行肿瘤标记物如CA19-9的检测和ctDNA的提取。抽血后立即对所有样本进行处理。本研究经天津市肿瘤医院伦理委员会批准。对入组患者进行中位随访时间为18个月的调查。2.ctDNA的提取:利用血浆循环DNA提取试剂盒(QIAamp Circulating Nucleic Acid kit,德国,QIAGEN),按操作说明提取血浆循环DNA。3.KRAS突变的检测:将提取出的DNA进行定量分析后,利用人KRAS突变检测试剂盒(中国,精耐特公司),按操作说明检测患者循环DNA中是否存在KRAS突变。4.采用SPSS 22.0统计学软件及Graphpad软件对数据进行统计分析。通过卡方检验或Fisher精确检验,确定ctDNA的KRAS突变与患者临床病理特征的相关性。采用Kaplan-Meier方法对OS和PFS进行单因素和多因素生存分析,使用Cox回归模型评估ctDNA中KRAS突变和其他协变量对PFS和OS的影响。研究结果:入组本试验的胰腺癌患者中位生存期14个月。循环肿瘤DNA KRAS突变率约为34.4%。然而我们发现循环肿瘤DNA中的KRAS突变基本与除临床分期之外的临床病理相关因素均无相关性,包括肿瘤大小、淋巴结转移情况等。单因素及多因素分析表明循环肿瘤DNA KRAS突变与无进展生存(PFS)及总生存期(OS)密切相关。ctDNA KRAS可作为血液中的生物标记物来预测胰腺癌的预后,甚至可帮助医师进一步完善对IIB/III期患者进行进一步风险分层。研究结论:循环肿瘤DNA KRAS突变可将胰腺癌患者的预后进行分级。对于行根治性切除后规律化疗的胰腺癌患者,ctDNA KRAS突变是一项独立危险因素。通过补充了液态活检ctDNA的TNM分期可以更加准确的评估患者预后。在本研究中这种生物标记有望可以将处于IIB/III期的胰腺癌患者进一步风险分级。在IIB/III的胰腺癌患者中,ctDNA KRAS突变阳性患者的预后明显比阴性组患者的预后更差。本研究表明液态活检技术ctDNA可被当做影响患者预后的有效标记物。并且,它可基于胰腺癌疾病分期来预测患者生存率,建立TNMB分期系统。另外,ctDNA KRAS阳性可筛选出接受根治性切除术及规范化疗患者中预后较差的人群,可提示此类患者是高危状态,需密切关注随访,可术前考虑选择新辅助化疗及调整术后辅助治疗策略来改善患者预后。