等离子体诱变选育高产纳米硒灵芝菌株的研究

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灵芝(Ganoderma lingzhi)作为一种补益型药食用菌,自古以来备受关注。现代医学研究表明,灵芝在抗癌抑癌,降血糖血脂,保肝护肝以及治疗肾炎等方面效果显著。硒(Se)是一种不可缺少的微量元素在人体中发挥着重要作用。其具有提高免疫力,抗氧化以及抗衰老的作用,尤其抗氧化性比维生素E高500倍,也是某些金属的解毒剂。灵芝功效和硒功效的叠加使富硒灵芝具有更高的实用价值,灵芝富硒能力比其它食用菌高,转化硒的能力水平显著。灵芝富硒会增加灵芝多糖,蛋白质含量,所以富硒灵芝具有明显优势。本论文围绕灵芝富硒进行研究,主要利用等离子体诱变获得灵芝富硒突变菌株,并研究了等离子体处理对灵芝菌丝体生物学效应的影响。主要研究结果如下:(1)采用平板培养和摇瓶培养对灵芝菌株进行初筛。结果表明:接种的灵芝菌株在平板上日生长量最大的为G0126生长速度为0.61 cm/d。G0126摇瓶培养生物量最大菌丝体干重为7.8 g/L,菌丝硒含量为314 ug/g。此菌种在摇瓶培养长势良好,菌丝球大小均匀,菌丝体洁白粗壮。综合考虑选择G0126菌株作为后续研究菌株。(2)应用介质阻挡放电(DBD)等离子体对一种富硒灵芝的原生质体进行诱变处理,使用电压15.6kV、电流1.8mA、放电频率1.8kHz、处理2.5min等,在此条件获得灵芝富硒诱变株,通过随机扩增多态性DNA标记(RAPD)法鉴定,筛选出6株突变菌株。对突变菌株进行传代培养,富硒培养测定菌丝体中硒含量发现突变菌株(H10)与出发菌株相比,菌丝体中纳米硒含量提高了大约30%,从而证明得到富硒的优良突变菌株。(3)研究了低温等离子体处理对灵芝菌丝体的影响。实验表明,等离子体处理对灵芝菌丝生长速度、生物量、灵芝多糖均有影响。发现处理时间为0.5 min灵芝菌丝生长最快比对照组提高9.96%;处理时间为1 min生物量和灵芝多糖含量最高与对照组分别提高25.3%和44.66%;在一定时间处理范围内,等离子体能提高灵芝菌丝生长速度,生物量以及灵芝多糖含量。
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