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目的： 外周T细胞淋巴瘤（Peripheral T-cell lymphoma,PTCL）是一类高度异质性的恶性肿瘤，对传统化疗不敏感且易复发，目前尚无标准治疗方案。近年来，随着表观遗传学的发展，针对组蛋白去乙酰化酶（Histone deacetylase, HDAC）新型抑制剂的问世为PTCL的治疗带来了新的希望。然而HDACs在中国PTCL包括外周T细胞淋巴瘤非特指型（Peripheral T-cell lymphoma,not otherwise specified,PTCL-NOS）、血管免疫母细胞淋巴瘤（Angioimmunoblastic T-cell lymphoma,AITL）、NK/T细胞淋巴瘤（NK/T-cell lymphoma,NK/T）和间变大细胞淋巴瘤（anaplastic large cell lymphoma,ALCL）等的表达和临床预后价值，以及HDAC抑制剂对PTCL细胞的作用机制目前尚未完全清楚。本研究的目的如下：（1）首先检测HDAC1、HDAC2和EZH2在PTCL-NOS、AITL、NK/T和ALCL淋巴瘤病理组织中表达水平，分析HDAC1、HDAC2和EZH2表达水平与患者临床特征及预后的相关性，同时分析HDACs与EZH2的相关性；（2）初步探索HDAC抑制剂西达本胺（Chidamide, CS055）单药和联合阿霉素诱导NK/T淋巴瘤细胞系NK92MI凋亡的作用机制。以期为我国PTCL新的治疗策略提供理论基础。 方法： 1、采用免疫组化检测61例中国PTCL淋巴瘤包括PTCL-NOS、AITL、NK/T和ALCL病理组织中HDAC1、HDAC2和EZH2表达水平，并分析其与患者临床特征、总生存（overall survival,OS）的相关性。 2、采用Cox模型多因素分析影响PTCL患者OS的独立预后因素，采用Spearman分析HDACs与EZH2之间的相关性。 3、采用MTS法和流式细胞仪分别检测CS055抑制NK92MI细胞增殖作用和诱导细胞凋亡的影响。同时探索CS055联合化疗药物阿霉素对NK92MI细胞增殖抑制作用和细胞凋亡是否具有协同效应。 4、采用Western blotting分析CS055作用NK92MI细胞后对HDAC和组蛋白H3乙酰化即Ac-H3（Lys9）表达的调控作用。 5、采用Western blotting分析CS055对NK92MI细胞DNA损伤标记p-γH2AX表达的影响。 6、采用罗丹明123染色检测CS055对NK92MI细胞线粒体膜电位（MMP）的影响。 7、采用Western blotting检测线粒体介导细胞凋亡途径中凋亡相关蛋白的表达。 结果： 1、免疫组化染色结果显示，HDAC1、HDAC2和EZH2在中国PTCL病理组织表达水平较高。其中HDAC1在PTCL-NOS高表达率为59.46％、NK/T高表达率为85.71%、ALCL高表达率为84.62%、AITL高表达率为25%；HDAC2在PTCL-NOS高表达率为70.27%、NK/T高表达率为85.71%、ALCL高表达率为69.23%、AITL高表达率为50%；EZH2在PTCL-NOS高表达率为70.27%、NK/T高表达率为100%、ALCL高表达率为76.92%、AITL高表达率为50%。 2、相关性分析结果显示，HDAC2和EZH2表达均与临床分期、IPI评分、B2-MG和LDH相关（P<0.05）；而HDAC1表达仅与发病年龄、IPI评分及β2-MG相关（P<0.05）。 3、预后相关性分析结果显示，HDAC2和EZH2高表达组的患者OS较其低表达组更差，且具有显著统计学差异（P<0.05），而 HDAC1高表达组与低表达组的患者OS并无显著统计学差异（P>0.05）。提示HDAC2和EZH2在PTCL发生发展中起着重要调控作用。 4、Cox模型多因素分析结果显示，LDH（HR=4.767，95% CI：1.803～12.600， P=0.002）、β2-MG（HR=2.511，95% CI：1.226～5.144，P=0.012）、Ki-67（HR=3.345，95% CI：1.378～8.118，P=0.008）、临床分期（HR=5.049，95% CI：1.915～13.316， P=0.001）是PTCL患者预后不良的独立因素，其中HDAC2表达也是PTCL患者预后不良的独立因素（HR=0.335，95% CI：0.123～0.914，P=0.033）。 5、Spearman相关性分析结果显示，HDAC2和EZH2在PTCL病理组织中的表达具有显著相关性（P<0.05）。 6、细胞增殖实验结果显示，CS055可抑制NK92MI细胞的增殖，并呈时间和剂量依赖性；联合阿霉素后，对NK92MI细胞的增殖抑制具有协同作用。 7、细胞凋亡实验结果显示，CS055可诱导 NK92MI细胞凋亡，并呈剂量依赖性；联合化疗药物阿霉素后，NK92MI细胞凋亡率明显增加，且与单药组比较具有显著差异（P＜0.01）。 8、Western blotting检测结果显示，CS055可诱导NK92MI细胞Ac-H3（Lys9）水平升高，并呈剂量依赖性，而对 HDAC2自身表达无明显影响。提示 CS055不直接调控HDAC2的表达，而直接作用HDAC2的功能。 9、Western blotting检测结果也显示，CS055可增加DNA损伤标记物p-γH2AX的表达；联合阿霉素后，可增强其作用。 10、罗丹明123染色结果显示，CS055可降低NK92MI细胞MMP，并呈剂量依赖性；联合阿霉素后，可显著增强其作用。 11、线粒体介导细胞凋亡相关蛋白检测结果显示，CS055可增强 Cleaved-PARP的表达，抑制抗凋亡蛋白BCL-2表达；联合阿霉素后，可显著增强其作用。 结论： 1、HDAC1、HDAC2和EZH2在中国PTCL中高表达， HDAC2和EZH2高表达显著影响PTCL患者OS（P<0.05），HDAC1未观察到此现象；HDAC2和EZH2的表达具有显著相关性（P<0.05）。 2、CS055可抑制NK92MI细胞增殖，联合阿霉素能增强其抑制效应。 3、CS055可诱导NK92MI细胞凋亡，联合阿霉素能增强其诱导凋亡的效应。 4、CS055诱导PTCL凋亡的作用机制可能如以下模式：CS055调控细胞Ac-H3（Lys9），同时诱导细胞DNA损伤→组蛋白H3感应DNA损伤，转入细胞质，介导MMP改变→启动线粒体介导细胞凋亡途径→导致细胞凋亡。 5、CS055联合阿霉素协同诱导PTCL凋亡的作用机制可能如下：CS055调控细胞 Ac-H3（Lys9）水平升高→DNA与组蛋白解离，核小体松弛→阿霉素嵌入到解离的DNA双链中→诱导细胞DNA损伤→最终协同诱导细胞凋亡。