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运用线粒体DNA中编码rRNA蛋白质的基因16S rRNA作为分子标记,选取半翅目Hemiptera蝽科Pentatominae蝽亚科Pentatominae7族18属22个代表种,共27个个体对其亲缘关系进行初步研究.通过特异引物扩增和基因测序的研究方法获得它们的线粒体DNA(mtDNA)的16S rRNA基因片段,并分析了其遗传多态性.在扩增的长为400bp的基因片段中,去掉两端引物,通过排序,有350个碱基可用于这27个个体的比较.通过测定分析该基因片段的序列发现,27个个体具有27种基因型,不同种群存在丰富的DNA序列多态性,同一种的不同个体差异较小.DNA序列应用ClustalX1.8、DnaSP、Bioedit5.09、MEGA软件进行排序、比较和分析,并计算核苷酸组成、多态性位点以及遗传距离,用邻位相连法构建Neighbor-joining(NJ)系统进化树,从而确定各类群之间的系统关系.通过分析得出以下结论:1.在国内首次使用特异引物扩增蝽亚科昆虫的mtDNA-16S rRNA基因片段,通过测序获得了蝽亚科7族18属22种27个个体的基因序列片段.研究发现16S rRNA基因片段适合于族、属之间亲缘关系的研究.2.无水乙醇浸制标本可应用于总DNA的提取、16S rRNA基因片段的特异引物扩增、提纯和测序.3.该实验中,标本DNA的轻微降解不影响实验结果.4.在扩增的16S rRNA基因片段中,共检测到核苷酸变异位点191个,占总序列的54.57%,除去具缺失或插入的位点后,序列变异为42.57%.A、T、C、G的平均含量为33.84%、43.24%、6.78%、16.14%,A+T的含量为77.08%,G+C的含量为22.92%,这一结果与昆虫中A+T的含量高于G+C的含量这一结论是一致的.5.以"Bootstrap Test of Phylogeny"1000次重复作出各个分枝的置信度.形成的Neighbor-Joining(NJ)、Minimum Evolution(ME)和Maximum Parsimony(MP)分子系统树表明,NJ树的置信度最高.6.以蝽亚科昆虫27个个体的16S rRNA基因序列构建的分子系统树显示:麻皮蝽属与菜蝽属的遗传关系较近,二者位于进化树的底部,说明这两个种比其它类群起源较早;绿蝽属和碧蝽属的亲缘关系比较近,二者又与玉蝽属互为姐妹群;条蝽属与斑须蝽属互为姐妹群;二星蝽属与辉蝽属的亲缘关系较近,之后二者又与卵圆蝽属互为姐妹群;蝽族的真蝽属与岱蝽属的关系比全蝽属的亲缘关系近,全蝽属与格蝽属互为姐妹群.这与传统分类中属的关系有较大差异.